实验室如何确诊鸡产蛋下降综合征？

（1）病毒分离与鉴定 从患鸡的输卵管、变形卵泡、无壳软蛋、泄殖腔、鼻咽黏膜、肠内容物等采集病料，经过研磨、离心、过滤除菌后接种在鸡肾或鸭肾细胞上，孵育72～96h后观察细胞病理变化及核内包涵体（需进行包涵体染色），并用血凝（HA）及血凝抑制（HI）试验进行鉴定，用参比标准阳性HI血清检测出细胞培养物的效价。接种在5～10日龄的鸭胚尿囊腔，可使鸭胚致死，其尿囊液有高的凝集滴度。从产蛋下降综合征血清阳性的鸡中，病毒的分离率约为63%；从产蛋异常的鸡群中，病毒分离率可达60%。

（2）血清学方法

①血凝（HA）试验和血凝抑制（HI）试验。

HA试验：一般采用微量法，在微量凝集反应板上进行，以使红细胞发生100%凝集的最高稀释度作为血凝价。

HI试验：常采用微量法，血清直接在抗原中作倍数稀释。以完全抑制凝集血清的最大稀释度为该血清的HI滴度，每次测定应设已知滴度的标准阳性血清对照和4单位病毒对照。待检血清的抑制价在8倍以上为阳性。

②琼脂扩散试验。可将种毒经尿囊腔接种于13～14日龄鸭胚，取接种后96h的鸭胚尿液经甲醛处理后作为琼脂免疫扩散抗原。抗原与待检血清间出现特异性沉淀线者，判为阳性。

③其他血清学诊断方法。病毒中和试验也是比较敏感、特异的方法。常用于检验禽腺病毒抗原或血清抗体。

（3）分子生物学方法 设计禽腺病毒特异PCR引物进行扩增，以出现特异性条带并测序作为判定的标准。