支原体、立克次体和衣原体的微生物学检查及防治原则
1.标本采集
(1)痰液标本:疑为肺炎支原体感染,可用咽拭子采集患者咽部分泌物或痰液标本,并立即浸入液体培养基或接种固体培养基,培养基中可添加醋酸铊或青霉素以抑制杂菌生长;疑为肺炎衣原体感染,通常取咽拭标本或支气管肺泡灌洗液,标本最好用膜式滤菌器除去杂菌,不加抗生素。
(2)血液标本:疑为立克次体感染者应采集血液进行诊断。一般在发病初期或急性期末应用抗生素治疗前采血。因立克次体特别容易引起实验室内的人体感染,故必须严格遵守实验室操作规程,防止感染事故的发生。
(3)分泌物标本:疑为溶脲脲原体感染者可采集精液、前列腺液、阴道分泌物、尿液等标本,采集后应立即接种。若不能立即接种,应将标本放4℃冰箱中保存,但保存时间不宜过长,一般不超过12小时。沙眼衣原体感染者应采集眼穹隆或眼结膜分泌物涂片,也可进行眼结膜刮片;对泌尿生殖道患者可采用泌尿生殖道拭子法采集标本,也可采集精液或尿液。标本常用含有抗生素的蔗糖磷酸盐保存,并快速送检。
2.分离培养与鉴定 肺炎支原体初次分离的阳性率较差,多次传代后生长加快,菌落成典型油煎蛋样。分离的支原体可经形态、血细胞吸附、生化反应以及特异性抗血清作生长抑制试验进行鉴定。
溶脲脲原体标本:接种在含有青霉素、尿素和酚红的液体培养基中,若液体培养基由黄变红,液体澄清的为阳性。用固体培养基分离培养时可用低倍镜观察是否有微小煎蛋或颗粒状菌落生长。
可将立克次体感染者标本接种至雄性豚鼠腹腔。若接种后豚鼠体温超过40℃,同时有阴囊红肿,表示有立克次体感染,应进一步将分离出的毒株进行鸡胚或细胞培养,用免疫荧光试验加以鉴定。(https://www.daowen.com)
沙眼衣原体标本:接种于6~9天鸡胚的卵黄囊和尿囊中,可获得较为满意的分离结果;用Hep-2和HeLa细胞株培养肺炎衣原体较易生长。
3.其他检查法 冷凝集试验可辅助诊断肺炎支原体感染。在临床上用病人血清与自身红细胞混合,4℃过夜,观察红细胞有无凝集现象。如有凝集存在,放37℃时其凝集又分散开,即冷凝集试验阳性。但仅有50%左右患者出现阳性反应。
外斐反应可辅助诊断流行性和地方性斑疹伤寒。如抗体滴度≥1∶160或随病程延长而滴度增长≥4倍,为阳性反应。但必须同时结合流行病学和临床症状才能做出正确诊断。
此外,应用ELISA法检测患者血清中抗体滴度,或用直接免疫荧光法检测标本中的抗原以及应用核酸检测技术也可快速做出准确的诊断。
4.防治原则 预防支原体、立克次体和衣原体感染的主要方法是积极治疗患者。及时发现、早期隔离、正确治疗患者;医学观察密切接触者21天。灭鼠除草,防螨、蜱等叮咬。注意公共卫生和个人卫生,不要使用公共毛巾、浴巾和脸盆,避免直接接触感染人群,控制或消灭储存宿主及传播媒介可切断其传播途径。新生儿可在出生时使用0.5%红霉素眼膏或1%硝酸银,以防新生眼结膜炎。对所有患者的性伴侣应给予预防治疗。此外,接种灭活疫苗可特异性地预防某些立克次体感染。
红霉素、四环素、多西环素、螺旋霉素、氯霉素或诺氟沙星等对上述病原体感染具有较好疗效,但磺胺对衣原体感染无效,而且还可促进立克次体繁殖。