2.降解物阻遏

菌丝体与槐糖保温的同时，加入葡萄糖（10-2 mol/l），则对纤维素酶的形成产生明显的阻遏作用（见表10），表现为延迟期的延长和酶活力高峰的推迟。但是，由于葡萄糖作为生长的碳源，增加了菌丝体的数量，最终的产酶量要高于对照。增加槐糖的浓度不能克服葡萄糖的阻遏作用，说明两者的作用不是竞争性的。但在同样的葡萄糖浓度水平下，槐糖浓度越高，形成的纤维素酶也越多。表10中还可看出，加入葡萄糖后，培养基的pH迅速地从5.3降为2.5，以后随着酶活力的升高而回升。若在诱导过程中，调节培养基中的pH，使其稳定在pH 5左右，葡萄糖对纤维素酶的产生仍呈现阻遏作用。葡萄糖对纤维素酶形成的阻遏作用不能被加入的c-AMP（5×10-3～5×10-2 mol/L）所解除（见表11）。

表10　葡萄糖对木霉EA3-867菌丝体在不同浓度槐糖诱导下纤维素酶形成的阻遏作用

注：菌令42小时；菌丝体重7.0毫克/瓶；诱导温度29.5℃。

表11　葡萄糖对槐糖诱导木霉EA3-867菌丝体纤维素酶的阻遏作用和c-AMP的作用

注：菌令45小时；菌丝体重11.7毫克/瓶；槐糖浓度5×10-4 M；诱导温度30.5℃。

除了葡萄糖外，其他各种糖、糖磷酸酯等，如果糖、半乳糖、木糖、核糖、乳糖、麦芽糖、G-6-p、6-PG，以及葡萄糖酸、甘油等对木霉EA3-867洗涤菌丝体纤维素酶的诱导形成都有不同程度的阻遏作用（见表12）。但蔗糖利用很慢，未见明显的阻遏作用，FDP也是例外。一般在加入阻遏剂后4小时左右，便表现明显的阻遏现象，到24小时后，阻遏剂基本上耗尽，各种阻遏大部分解除，并由于它们作为碳源，促进了生长，故最终纤维素酶的产量赶上或超过对照。

表12　糖和糖磷酯等对槐糖诱导木霉EA3-867菌丝体形成纤维素酶的阻遏作用

（续表）

注：菌令45小时；菌丝体重12.8毫克/瓶；槐糖浓度10-4 mol/L；诱导温度30℃；阻遏剂浓度10-2 mol/L。

EA3-867洗涤菌丝体纤维素酶的诱导形成还被三羧酸循环中的各种有机酸（10-2～5×10-2 mol/L），如醋酸、丙酮酸、柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、苹果酸、延胡索酸和草酰乙酸所阻遏。辅酶NADP、NAD和ATP也有阻遏作用（见表13）。

表13　三羧酸循环中的有机酸及ATP、NADP、NAD对槐糖诱导木霉EA3-867菌丝体形成纤维素酶的阻遏作用

注：菌令45小时；菌丝体重11.1毫克/瓶；槐糖浓皮10-4 mol/L；阻遏剂在0小时加入。

EA3-867洗涤菌丝体先同槐糖预保温4小时，再加入各种阻遏剂（10-2 mol/L），一起震荡培养，90分钟后，测定纤维素酶的活力，则葡萄糖、各种有机酸和辅酶等对纤维素酶形成仍有阻遏作用（见表14），但24小时后，纤维素酶活力大多又恢复。

表14　槐糖诱导木霉EA3-867菌丝体形成纤维素酶的中途加入三羧酸循环申有机酸和ATP、NADP、NAD对产酶的阻遏作用

注：菌令45小时；菌丝体重13.8毫克/瓶；槐糖浓度10-4 mol/L；诱导温度30℃。
菌丝体先同槐糖保温震荡4小时（此时酶活Cx为3.9 u/ml），再加入各种阻遏剂，浓度均为10-2 mol/L，并在加入后90分钟和20小时测定纤维素酶活力。