9.3.3 实验材料及仪器
1)血液涂片
取一张边缘整齐的载玻片,在其一端蘸取血液等液体材料少许,在另一张洁净的玻片上,以45°角均匀堆成一薄层的涂面。
2)染色液
(1)瑞氏染料
由酸性染料伊红(Eosin,E)和碱性染料亚甲蓝(Methylene blue,M)组成的复合染料。亚甲蓝(又名美蓝),有对醌型和邻醌型两种结构,通常为氯盐,即氯化美蓝。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。伊红通常为钠盐。将适量的伊红,美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料。(https://www.daowen.com)
甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红(ME),使其解离为M+和E+,后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色;二是具有很强的脱水作用,可固定细胞的形态,当细胞发生凝固时,蛋白质被沉淀为颗粒状或者网状,增加细胞结构的表面积,提高对染料的吸附作用,增强染色效果。
(2)瑞氏染液的配制
取瑞氏染料0.1 g、甲醇600mL、甘油15mL,在研钵中混合研磨,再加入甲醇60mL使其溶解,装入棕色瓶中越夜,次日过滤,盛于棕色瓶中,保存于暗处。保存越久,染色越好。
3)其他
显微镜,载玻片,接种环,吸水纸,香柏油,玻璃缸,玻片搁架。