9.6.4　操作步骤

1）玻璃纸法

①将玻璃纸剪成培养皿大小，用旧报纸隔层叠好后灭菌。

②将放线菌斜面菌种制成10-3的孢子悬液。

③将高氏Ⅰ号琼脂培养基熔化后在火焰旁倒入无菌培养皿内，每皿倒15 mL左右，待培养基凝固后，在无菌操作下用镊子将无菌玻璃纸覆盖在琼脂平板上即制成玻璃纸琼脂平板培基。

④分别用1 mL无菌吸管取0.2 mL吸水链霉菌孢子悬液、紫色直丝链霉菌孢子悬液分别滴加在两个玻璃纸琼脂平板培养基上，并用无菌玻璃刮铲涂抹均匀。(https://www.daowen.com)

⑤将接种的玻璃纸琼脂平板置28～30℃下培养。

⑥在培养至3 d、5 d、7 d时，从温室中取出平皿。在无菌环境下。打开培养皿，用无菌镊子将玻璃纸与培养基分离，用无菌剪刀取小片置于载玻片上用显微镜观察。

2）插片培养法

放线菌的插片培养是将放线菌菌种制成孢子悬液后（浓度以10-3～10-2为好），0.2 mL放在适合放线菌生长的平板培养基上，用玻璃刮铲涂布均匀，然后将灭过菌的盖玻片斜插入固体培养基中，置28～32℃下培养，3～5 d后取出盖玻片放在载玻片上镜检，可见放线菌的自然生长的个体形态。观察时，要注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。