9.12.4　操作步骤

9.12.4　操作步骤

1）药敏片的制备

取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6 mm直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经0.1 MPa15～20 min高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。

2）药液的制备（用于商品药的试验）

按商品药的使用治疗量的比例配制药液。

3）抗菌药纸片制作

在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25 mL，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3～6个月。

图9.6　细菌药敏实验示意图

4）无菌操作

用接种环取细菌培养物，在营养琼脂平板上密集均匀划线。(https://www.daowen.com)

5）贴片

用无菌镊子夹取各种抗菌药物圆纸片（一般在试纸片上标记有药物名或代号），按图9.6轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面，一次放好，不能移动，各纸片间的距离要大致相等。

6）培养

平皿倒置，37℃温箱中培养18～24 h。

7）结果观察

根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，按下列标注确定细菌对抗生素等药物的敏感度（表9.9）。

表9.9　细菌对不同抗菌药物敏感度标准

续表