三、实验内容
（一）材料与仪器
1.材料
主要有陈皮、薄荷油、β-环糊精、无水乙醇、无水硫酸钠、石油醚、乙酸乙酯、1%香荚兰醛浓硫酸溶液等。
2.仪器
主要有分析天平、圆底烧瓶、量筒、烧杯、恒温磁力搅拌器、抽滤泵、薄层板、层析缸等。
（二）实验部分
1.陈皮挥发油-β-环糊精包合物的制备
【处方】
陈皮挥发油-β-环糊精包合物处方见表14-2。
表14-2 陈皮挥发油-β-环糊精包合物处方
【制备】
（1）陈皮挥发油的制备：取陈皮粗粉120 g，加入10倍量的蒸馏水，经挥发油提取器提取2.5 h，收集挥发油，测定器中淡黄色浑浊液体用无水硫酸钠脱水后，得淡黄色油状澄明液体，即得陈皮挥发油，备用。
（2）陈皮挥发油乙醇溶液的制备：量取陈皮挥发油2 mL（约1.75 g），加无水乙醇10 mL溶解，即得，备用。
（3）β-环糊精饱和水溶液的制备：称取β-环糊精16 g，加蒸馏水200 mL，在60℃制成饱和水溶液，保温，备用。
（4）陈皮挥发油环糊精包合物的制备：分别量取陈皮挥发油乙醇溶液10 mL与β-环糊精饱和水溶液200 mL，将环糊精饱和水溶液置圆底烧瓶或烧杯中，60℃恒温搅拌，将陈皮挥发油的乙醇溶液缓缓滴入β-环糊精饱和水溶液中，待出现白色沉淀时，继续搅拌至室温，最后用冰浴冷却，待沉淀析出完全后，抽滤至干，用无水乙醇洗涤至表面无油渍为止。50℃以下干燥，称重，计算包合物收率。
（5）薄层色谱法验证包合物的形成：
①样品的制备：取陈皮挥发油-β-环糊精包合物0.5 g，加无水乙醇2 mL溶解，过滤，滤液为样品a；取陈皮挥发油两滴，加无水乙醇2 mL溶解，为样品b；取0.5 g β-环糊精，溶于2 mL无水乙醇，为样品c；取陈皮挥发油-β-环糊精包合物0.5 g，加无水乙醇2 mL，于70%功率下超声2 min，过滤，滤液为样品d。
②展开条件：取样品a、b、c、d各10 μL，点于同一硅胶板上，用正己烷-三氯甲烷（40∶1，mL/mL）为展开剂，展开前密闭层析缸，使层析缸里的展开剂达到饱和状态，之后上行展开，取出、晾干，用1%香荚兰醛浓硫酸溶液喷雾后，烘干显色。
（6）包合物含油率和油的收率测定。
①精密量取陈皮挥发油0.4 mL，置圆底烧瓶中，加蒸馏水40 mL，用挥发油测定法提取陈皮挥发油并计量。
②称取相当于0.4 mL陈皮挥发油的包合物置圆底烧瓶中，加蒸馏水40 mL，用挥发油测定法提取陈皮挥发油并计量。
挥发油测定法参照《中国药典》2015年版四部通则2204，根据①、②测定结果计算含油率和油的收率。
【注解】
（1）自制挥发油一定要脱水，才能得澄明油状液体。
（2）β-环糊精饱和水溶液要保温于60℃，否则不能得到澄清水溶液。
（3）包合制备过程中，包合温度应控制在60℃±1℃，搅拌时间应充分，否则会影响收率。
（4）TLC法验证时，样品量应适当，且待乙醇挥发完全后再展开，否则容易造成拖尾。
（5）香草醛浓硫酸使挥发油结构中的羧基脱水，增加双键结构，再经双键位移、双分子缩合等反应生成共轭双键系统，在酸作用下可形成阳碳离子盐而显色。
【质量检查】
（1）性状：白色干粉，略有陈皮味。
（2）鉴别：样品a不显色，样品b显示陈皮挥发油的特征斑点，样品c不显色，样品d显示陈皮挥发油的特征斑点，但颜色略淡。
（3）收率：按照上式公式计算含油率、油的收率、包合物的收率。
2.薄荷油-β-环糊精包合物的制备
【处方】
薄荷油-β-环糊精包合物处方见表14-3。
表14-3 薄荷油-β-环糊精包合物处方
【制备】
（1）β-环糊精饱和水溶液的制备：称取β-环糊精4 g，置100 mL带塞瓶中，加蒸馏水50 mL，加热60℃溶解，即得β-环糊精饱和水溶液，备用。
（2）薄荷油-β-环糊精包合物的制备：量取薄荷油1 mL，溶于5～10 mL无水乙醇，缓慢逐滴加到60℃的β-环糊精饱和水溶液中，待出现浑浊并逐渐有白色沉淀析出，不断搅拌2.5 h，之后停止加热，继续搅拌至室温，抽滤至干，用无水乙醇洗涤3次至表面无油渍为止，即得。将包合物置干燥器中干燥，称重，计算包合物收率。
（3）薄层色谱法验证包合物的形成：
①样品的制备：取薄荷油-β-环糊精包合物0.5 g，加无水乙醇2 mL溶解，过滤，滤液为样品a；取薄荷油两滴，加无水乙醇2 mL溶解，为样品b；取0.5 g β-环糊精，溶于2 mL无水乙醇，为样品c；取薄荷油-β-环糊精包合物0.5 g，加无水乙醇2 mL于70%功率下超声2 min，过滤，滤液为样品d。
②TLC展开条件：取样品a、b、c、d各10 μL，点于同一硅胶板上，用石油醚-乙酸乙酯（1∶19，mL/mL）为展开剂，展开前密闭层析缸使层析缸里的展开剂达到饱和状态，上行展开，用1%香荚兰醛浓硫酸溶液喷雾后，烘干显色。
（4）包合物含油率和油的收率测定：
①精密量取薄荷油0.4 mL，置圆底烧瓶中，加蒸馏水40 mL，用挥发油测定法提取薄荷油并计量。
②称取相当于0.4 mL薄荷油的包合物置圆底烧瓶中，加蒸馏水40 mL，用挥发油测定法提取薄荷油并计量。
挥发油测定法参照《中国药典》2015年版四部通则2204，根据①、②测定结果，计算含油率和油的收率。
【注解】
同“陈皮挥发油-β-环糊精包合物”项下。
【质量检查】
同“陈皮挥发油-β-环糊精包合物”项下。