三、实验内容
(一)仪器与材料
1.仪器
主要有分析天平、溶出仪、取样器、微孔滤膜(0.45 μm或0.8 μm)、容量瓶(50 mL,500 mL)水浴锅、紫外-可见分光光度计。
2.材料
主要有阿司匹林结晶、阿司匹林片、0.4 mol/L盐酸、0.4 mol/L氢氧化钠、硫酸铁铵指示液、人工胃液等。
(二)实验部分
1.阿司匹林标准曲线
精密称取阿司匹林结晶250 mg,悬浮于250 mL蒸馏水中,在40~50℃水浴中不断搅拌至溶解,冷却后移入500 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL分别置于50 mL容量瓶中,加25 mL蒸馏水,用0.4 mol/L NaOH溶液调节pH至9~10。在沸水浴中加热5 min,冷却后,用0.4 mol/L HCl调节pH至3~4,加5滴硫酸铁铵指示液,加蒸馏水至刻度,摇匀。在530 nm波长中测吸光度,以阿司匹林浓度(C,μg/mL)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,拟合阿司匹林标准曲线。
2.阿司匹林含量测定
取20片阿司匹林称重,研细,称取相当于平均片重阿司匹林的细粉。将细粉悬浮于400 mL蒸馏水中,在温度40~50℃水浴中不断搅拌至溶解,冷却后,用蒸馏水补充至500 mL,过滤。取续滤液5 mL,置50 mL容量瓶中,加25 mL蒸馏水,同“阿司匹林标准曲线操作”,测得吸光度代入标准曲线,计算主药含量(%,g/g)。
3.阿司匹林片体外释放率的测定
(1)取人工胃液1000 mL于溶出杯中,置于溶出仪恒温水浴中,维持37℃±1℃。
(2)取阿司匹林1片,投入转篮内,按溶出仪操作规程设定取样时间,转篮转速设为100 r/min。5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、60 min定时取样10 mL,并同时补加人工胃液10 mL,将所取样品过滤,取续滤液5 mL,同“阿司匹林含量测定”操作,求得药物浓度,计算累积溶出量和累积释放率。
【注意事项】
(1)溶出仪应预先检查水箱温度、转速是否精确,转篮升降是否灵活等。
(2)水箱应加蒸馏水,以免长期使用腐蚀温控零件等部件。若注入热水,温度应低于37℃。
(3)转篮距离溶出杯底部准确到25 mm;取样点应在转篮顶端至液面的中点,距溶出杯内壁10 mm处;取样后应及时补充同体积同温度的空白溶出介质,并立即用微孔滤膜在30 s内完成过滤。
(4)样液过滤时,注意滤膜应无破损,安装应紧密正确。