方法适用性建立

九、方法适用性建立

9.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。

9.2 需氧菌计数方法适用性试验。

9.2.1 试验组。分别取复方薄荷脑滴鼻液1∶10的供试液2 mL,加到5个灭菌的三角瓶中,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,过滤,用200 mL的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗,每次100 mL,分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),制成每毫升复方薄荷脑滴鼻液1∶10的供试液,含菌数小于100 cfu,取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上,培养、计数。

9.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液,进行薄膜过滤,测定阳性对照菌数。

9.2.3 供试品对照组。取复方薄荷脑滴鼻液1∶10的供试液2 mL,加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,用200 mL的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗,每次100 mL,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上,进行培养、计数。

9.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基2 mL替代样品,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上,进行培养、计数。

9.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。

9.3.1 试验组。分别取复方薄荷脑滴鼻液1∶10的供试液2 mL加到灭菌的三角瓶中,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,过滤,用200 mL的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗,每次100 mL,分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液,制成每毫升复方薄荷脑滴鼻液1∶10的供试液,含菌数小于100 cfu,取出滤膜,面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基上,培养、计数。

9.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定阳性对照菌数。

9.3.3 供试品对照组。用供试品替代试验组液体注皿,计数。

9.3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基2 mL替代样品,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基上,进行培养、计数。

计数方法适用性试验结果见表8。

表8 计数方法适用性试验

注:-表示平板无菌落生长。

9.4 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌方法适用性,按预试验方法可以检出目标菌,方法可行。