方法适用性建立
2025年08月10日
七、方法适用性建立
7.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。
7.2 需氧菌计数方法适用性试验。
7.2.1 试验组。分别取藿香正气水2 mL,加到5个灭菌的三角瓶中,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL,分别加入金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),进行薄膜过滤,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗,每膜300 mL,取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上,培养、计数。
7.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液,进行薄膜过滤,测定阳性对照菌数。
7.2.3 供试品对照组。同法进行试验。
7.2.4 阴性对照组。同法进行试验。
7.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。
7.3.1 试验组。分别取藿香正气水2 mL,加到2个灭菌的三角瓶中,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL,分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),进行薄膜过滤,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗,每膜300 mL,取出滤膜,面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基上,培养、计数。
7.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加到pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,进行薄膜过滤,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗,每膜300 mL,取出滤膜,面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基上,培养、计数,测定阳性对照菌数。
7.3.3 供试品对照组。同法进行试验。
7.3.4 阴性对照组。同法进行试验。
计数方法适用性试验结果见表6。
表6 计数方法适用性试验
注:-表示平板无菌落生长。
7.4 大肠埃希菌方法适用性,按预试验方法可以检出目标菌,方法可行。