计数方法适用性预试验(2)
2025年08月10日
六、计数方法适用性预试验(2)
6.1 试验组。取硼酸滴耳液(耳用)1∶10供试液分别加到2个灭菌的三角瓶中,每瓶10 mL,分别加入白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),制成每毫升1∶10供试液,含菌数小于100 cfu,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL,进行薄膜过滤,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗,每膜300 mL,取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,培养、计数。
6.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液,进行薄膜过滤,测定阳性对照菌数。
6.3 供试品对照组。取硼酸滴耳液(耳用)1∶10的供试液2 mL,加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,薄膜过滤后用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗,每膜300 mL,取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,进行培养、计数。
6.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,进行培养、计数。
计数方法适用性预试验(2)结果见表4。
表4 计数方法适用性预试验(2)
注:1.-表示平板无菌落生长。
2.白色念珠菌1在胰酪大豆胨琼脂培养基计数,白色念珠菌2在沙氏葡萄糖琼脂培养基计数。
3.黑曲霉1在胰酪大豆胨琼脂培养基计数,黑曲霉2在沙氏葡萄糖琼脂培养基计数。
结果:计数中白色念珠菌及黑曲霉回收率高于50%,方法可行。