方法适用性建立
9.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。
9.2 需氧菌计数方法适用性试验。
9.2.1 试验组。取三黄栓1∶1 000的供试液分别加到5个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升三黄栓1∶1 000的供试液，含菌数小于100 cfu，取含菌的样品溶液1 mL（小于100 cfu），置直径90 mm的无菌平皿中，每个菌液注2个平皿，注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养，测定菌数。
9.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，测定阳性对照菌数。
9.2.3 供试品对照组。取三黄栓1∶1 000的供试液1 mL，置直径90 mm的无菌平皿中，注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，进行培养、计数。
9.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，进行培养、计数。
9.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。
9.3.1 试验组。取三黄栓1∶100的供试液分别加到2个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升三黄栓1∶100的供试液，含菌数小于100 cfu，取含菌的样品1 mL（小于100 cfu），置直径90 mm的无菌平皿中，每个菌液注2个平皿，注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，进行培养、计数。
9.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定阳性对照菌数。
9.3.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体注皿，计数。
9.3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的稀释剂1 mL替代样品注皿，注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定阴性对照菌数。
计数方法适用性试验结果见表9。
表9 计数方法适用性试验
注：-表示平板无菌落生长。
9.4 金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌方法适用性，按预试验方法可以检出目标菌，方法可行。