计数方法适用性预试验（3）

7.1 试验组。取一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液2 mL加到pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液200 mL中，进行薄膜过滤，加入枯草芽孢杆菌0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升一次性水凝胶眼贴10 cm2∶10 mL的供试液，含菌数小于100 cfu，进行薄膜过滤，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。

7.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，进行薄膜过滤，测定阳性对照菌数。

7.3 供试品对照组。取一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液2 mL，加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液200 mL中，薄膜过滤后取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，进行培养、计数。

7.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，薄膜过滤后取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，进行培养、计数。

计数方法适用性预试验（3）结果见表5。

表5 计数方法适用性预试验（3）

注：-表示平板无菌落生长。

结果：计数中枯草芽孢杆菌回收率高于50%，方法可行。