方法适用性建立
8.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。
8.2 需氧菌计数方法适用性试验。
8.2.1 试验组。分别取一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液加到5个灭菌的三角瓶中，每瓶2 mL，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液200 mL，进行薄膜过滤，分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液，含菌数小于100 cfu，进行薄膜过滤，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。
8.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，进行薄膜过滤，测定阳性对照菌数。
8.2.3 供试品对照组。取一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液，每瓶10 mL，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液200 mL，进行薄膜过滤，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。
8.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，进行培养、计数。
8.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。
8.3.1 试验组。分别取一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液加到2个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升一次性水凝胶眼贴10㎝2∶10 mL的供试液，含菌数小于100 cfu，分别取1 mL注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数。
8.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液分别取1 mL注入20 mL沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定阳性对照菌数。
8.3.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体注皿，计数。
8.3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的稀释剂1 mL替代样品注皿，注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定阴性对照菌数。
计数方法适用性试验结果见表6。
表6 计数方法适用性试验
注：-表示平板无菌落生长。
8.4 铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌方法适用性，采用预试验方法进行试验，可以检出试验菌，方法可行。