计数方法适用性建立

八、计数方法适用性建立

8.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。

8.2 需氧菌计数方法适用性试验。

8.2.1 试验组。取藏双黄软膏1∶100的供试液分别加到5个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升藏双黄软膏1∶100的供试液，含菌数小于100 cfu，分别取1 mL注皿，每个菌液注2个平皿，加胰酪大豆胨琼脂培养基，培养、计数。

8.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，测定阳性对照菌数。

8.2.3 供试品对照组。取藏双黄软膏1∶100的供试液1 mL注皿，计数。

8.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，计数。

8.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。

8.3.1 试验组。取藏双黄软膏1∶100的供试液分别加到2个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升藏双黄软膏1∶100的供试液，含菌数小于100 cfu，分别取1 mL注皿，每个菌液注2个平皿，加沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养、计数。

8.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定阳性对照菌数。

8.3.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体注皿，计数。

8.3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，加沙氏葡萄糖琼脂培养基，计数。

计数方法适用性试验结果见表7。

表7 计数方法适用性试验

注：-表示平板无菌落生长。

8.4 铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌方法适用性，采用预试验方法进行试验，可以检出试验菌，方法可行。