倒置相差显微镜的工作原理

倒置相差显微镜（inverted phase contrast microscope）是倒置显微镜和相差显微镜的结合，既具有倒置显微镜的倒置观察方式，同时又具有与相差显微镜相一致的成像原理。因此，理解倒置相差显微镜的工作原理就需要分别研究倒置显微镜和相差显微镜的工作原理。

（一）倒置显微镜的工作原理

倒置显微镜的组成主要包括三部分：机械部分、照明部分、光学部分。其与普通显微镜的明显区别是物镜与照明聚光系统的相对位置。倒置显微镜的物镜在载物台之下，照明系统在载物台之上。这样的构造使得照明聚光系统与载物台的有效距离显著增加，便于放置培养皿、细胞培养瓶等较厚的观察器具，同时物镜与观察物之间的工作距离较短。因为倒置显微镜多用于观察培养的细胞，而细胞常常透明性大、结构对比不明显，因此倒置显微镜常配备相差物镜，实际上也就构成了倒置相差显微镜。(https://www.daowen.com)

（二）相差显微镜的工作原理

光线通过细胞时，由于细胞不同部位对光的折射率不同，通过细胞的光线和未通过细胞的光线便可以产生相位差。相差物镜通过特定的相差板使光发生干涉，如果衍射光线和0-级光线相位相反，则合光的振幅减小，物体图像变暗；如果相位相同，则合光的振幅增大，图像变亮，从而产生明暗不同的图像。因此，无色透明的样品在显微镜下表现出明暗的对比，进而被识别。