二、细胞复苏

一般通过急速升温的方法使冻存的细胞吸收水分，保证细胞结构不受影响。

1.37℃温育RPMI-1640培养基（含双抗和10%血清）。

2.取出冻存细胞放入37℃水浴锅中快速转动，1min内迅速融化，避免细胞内结晶的发生。(https://www.daowen.com)

3.将细胞悬液转移至离心管中并加入温育的培养液至10mL，900r/min离心10min，吸弃上清，再将细胞重悬于5～10mL培养液中，转移至培养瓶，放入37℃、5%CO2恒温培养箱中培养。

4.大约4～5h后，从培养箱中取出细胞放于倒置显微镜下观察细胞形态。

注意：平拿平放，不可用手触摸瓶皿接口处，观察细胞是否细胞贴壁，继续培养。