四、细胞传代

细胞传代是将培养的肿瘤细胞用胰酶消化、稀释、分配到新的培养瓶内继续培养的过程。观察培养瓶内细胞长满（细胞密度＞90%），进行传代。

1.将培养瓶中旧的培养液吸弃，移取2mLPBS于培养瓶中，轻轻摇晃洗涤并将液体倒出，用PBS洗涤2次。

2.加入1～2mL胰酶消化，倒置显微镜下观察至细胞轮廓分明约1～2min，倒掉胰酶，加入6mL新培养液，从上至下轻轻吹打，至瓶壁透明。(https://www.daowen.com)

3.将上述细胞悬液分装至2个新的培养瓶中，补齐新培养液至5～10mL/瓶。

4.将培养瓶放入37℃、5%CO2恒温培养箱中培养。