1.6.3　细胞冻存

细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放入细胞培养箱3min。加入1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpm×2min，弃上清液。加入1ml冻存液（90%血清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙醇，以保证温度降低的速度，目前国内有不放异丙醇的冻存盒出售，效果也好），立即放入-80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放入液氮，可以保存三个月。(https://www.daowen.com)