酶法提取蛹虫草中虫草素的研究

谢红旗，胡　瑕，罗　巍，夏志兰，刘东明，刘东波*

(湖南农业大学园艺园林学院，湖南 长沙 410128)

摘要：目的 研究UPLC测定虫草素的方法及酶法提取蛹虫草中虫草素的工艺条件。方法 对酶种类、酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解p H值进行考察，确定最佳提取工艺。结果 中性蛋白酶提取蛹虫草中虫草的最佳工艺为：酶用量1.5%，酶解温度50℃，酶解p H值5.5，酶解时间60min。结论 该工艺条件下，虫草素提取得率为0.732%，与未加酶的热水浸提相比，虫草素提取得率增加6.2倍。(https://www.daowen.com)

关键词：中性蛋白酶；蛹虫草；虫草素；UPLC

蛹虫草(Cordycep's militaris)又名北冬虫夏草、北虫草、蛹草，为子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草属模式种，是蛹虫草真菌寄生在鳞翅目夜蛾科昆虫蛹体上形成的子座与蛹体的结合体［1，2］，其子实体和菌丝体中含有虫草多糖和虫草素等多种生物活性物质，与冬虫夏草具有相似的药理功能。虫草素是虫草属真菌中的生物活性物质，其化学结构为3＇-脱氧腺苷(3＇-de-oxyadenosine)，是一种核苷类抗菌药，被证明具有多种药理作用，具有免疫调节作用，抗肿瘤作用，抗菌、抗病毒、抗炎、抗白血病及抗衰老作用［3- 6］，虫草素含量的高低是衡量虫草属真菌品质的重要指标之一，虫草素尤以蛹虫草中含量为高，而蛹虫草与冬虫夏草相比价格便宜许多，因此有望成为冬虫夏草的替代品。从蛹虫草中提取分离虫草素受到各方面的广泛关注［7，8］。

虫草素属于极性物质，易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂，文献报道除以水和乙醇为溶剂，采用热水浸提、索氏提取等常规提取方法外［9］，还报道了超声波辅助提取和微波辅助提取等一些现代提取分离方法［10- 13］。经过条件优化，上述方法能在一定程度上提高虫草素的提取得率，但效果不明显。生物酶辅助提取技术是近些年发展起来用于天然药物活性成分提取的新技术，具有专一、高效、成本低等特点［14，15］。本研究选择纤维素酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶及果胶酶辅助热水提取人工栽培的蛹虫草子实体中的虫草素，为虫草素的高效提取方法提供一定的参考。