产单核细胞增生李斯特菌（L.monocytogenes）

产单核细胞增生李斯特菌（L.monocytogenes）

产单核细胞增生李斯特菌在自然界广泛分布，可感染哺乳动物、鸟类、鱼类等多种动物。李斯特菌病是一种重要的食源性人兽共患病，兽医临床上主要对反刍动物致病，其他动物则主要表现为零星发病。

1.形态染色

为革兰阳性短杆菌，直或稍弯，两端钝圆，规则排列，偶有球状、双球状，大小为（0.4～0.5）µm×（1～2）µm，无芽孢，不形成荚膜（图4-1-1）。在20～25℃培养可产生周生鞭毛，具有运动性；在37℃培养则很少产生鞭毛，无运动性。

2.培养特性

（1）培养条件：需氧或兼性厌氧菌。生长温度为1～45℃，最佳生长温度为30～37℃，在4℃可缓慢增殖。可在含10% NaCl 的营养肉汤中生长。60℃环境下30min 可灭活。

（2）常用培养基（图4-1-2）：在普通琼脂培养基中可生长，为针尖大小的菌落，但在血清或全血琼脂培养基上生长良好，加入0.2%～1%的葡萄糖及2%～3%的甘油生长更佳。在含七叶苷的琼脂培养基（如PALCAM）上，菌落呈灰色，周围培养基颜色变黑。在绵羊血琼脂平板上生长，呈狭窄的β 溶血。酵母浸膏胰酪大豆琼脂（TSAYE）培养基上，用45℃入射光照射，菌落呈蓝色、灰色或蓝灰色。在李斯特菌显色培养基上菌落呈蓝色，外周有不透明的环。

（3）动力试验：在半固体或SIM 培养基上呈伞状生长（图4-1-3）。

（4）CAMP 试验：在血平板上平行划线接种金黄色葡萄球菌和马红球菌两条接种线，将可疑菌株垂直划线接种于两条线中间，靠近但不接触，产单核细胞增生李斯特菌靠近金黄色葡萄球菌处溶血区域增强（图4-1-4）。

3.生化反应

触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、水杨苷，不分解蔗糖、木糖、甘露醇。常见生化特性见表4-1-1。

4.分离鉴定(https://www.daowen.com)

（1）分离鉴定流程：产单核细胞增生李斯特菌是一种食源性病原微生物，因而对饲料、饮水及环境样本等的监测非常关键。目前相关的检验标准较多，方法也比较成熟，其分离鉴定流程可参照图4-1-5。

（2）与其他细菌的鉴别

① 李斯特菌属的鉴别：李斯特菌为G+杆菌，在细菌湿片上呈翻筋斗运动，触酶阳性，氧化酶阴性，七叶苷水解阳性，吲哚试验阴性，尿素酶阴性，与相关菌属的鉴别见表4-1-2。

② 李斯特菌属内菌的鉴别：产单核细胞增生李斯特菌呈狭窄的β 溶血，能分解鼠李糖，不分解木糖和甘露糖，CAMP 试验与金黄色葡萄球菌有协同溶血反应，与属内其他常见菌的鉴别见表4-1-3。

（3）商品化生化鉴定试剂及鉴定系统：使用商品化的微量生化鉴定试剂条和生化鉴定系统极大地提高了生化鉴定的速度及准确性。目前常用的生化鉴定系统有Listeria API（bioMerieux）、Micro-ID Listeria（Remel）和VITEK 2 Compact（bioMerieux），其他还有BBL Cry stal Gram-Pos ID（BD）、Microbact Listeria 12L（Oxoid）、Phoenix（BD）、MicroScan Walk Away（Siemens Healthcare）及Biolog 等鉴定系统，均能鉴定到种水平。

（4）MALDI-TOF MS 鉴定：随着基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术的应用越来越广泛，利用其质谱特征峰的不同可快速区分李斯特菌属内菌及其他易混淆的细菌（图4-1-6）。目前该技术已成功应用于产单核细胞增生李斯特菌的快速分型，可在一次检测中明确鉴定出其谱系和血清型。