空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）

空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）

1.染色形态

空肠弯曲菌革兰染色呈阴性，镜检多形态，可呈弧形、海鸥展翅形、S 形或螺旋形，长1.5～5µm，宽0.2～0.5µm，中间较宽，两端逐渐变细，3～5 个呈串或单个排列。陈旧培养物或大气环境等其他不适状态下，菌形常常变为球状［图9-1-1（a）］。该菌无芽孢、无荚膜，菌体两端各有一根鞭毛，长度可达菌体2～3 倍［图9-1-1（b）］。

2.培养特性

空肠弯曲菌为微需氧菌，在大气环境或厌氧环境下均不生长，其最适宜的生长环境为5%氧气、10% CO2和85%氮气；最适生长温度为42～43℃，37℃也可缓慢生长；适合生长的pH 为7.0～9.0，最适pH 为7.2。

空肠弯曲菌常用的分离培养基有Preston 肉汤、Bolton 肉汤、mCCD 琼脂、Skirrow 琼脂或其他商品化显色培养基（图9-1-2）。在mCCD 琼脂平板上的菌落通常为淡灰色、有金属光泽、潮湿、扁平。在Skirrow 琼脂平板上可出现多形态，第一型可疑菌落呈灰色、扁平、湿润、有光泽，常有沿接种线向外扩散的倾向；第二型可疑菌落常呈分散凸起的单个菌落，边缘整齐、发亮。空肠弯曲菌常规增菌培养可选用布氏肉汤和布氏琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板等。

3.生化反应

空肠弯曲菌具有弯曲菌属生化特性不活泼的特点：不发酵糖类，不分解尿素，不液化明胶。其部分生化特性可与其他弯曲杆菌相区分：MR 试验、吲哚试验均为阴性，不产生色素，氧化酶和过氧化氢酶阳性；在含有0.5% NaCl 培养基中能生长，含3.5% NaCl 的培养基中不生长，1%甘氨酸培养基、氯化三苯四氮唑（TTC40mg/100ml）培养基中能生长，对萘啶酸试验敏感，在三糖铁培养基中不产生H2S，用醋酸铅纸条测定可出现阳性。

4.分离鉴定

（1）空肠弯曲菌的分离鉴定流程：空肠弯曲菌的分离鉴定通常需要先进行弯曲菌属的鉴定，然后再进行种的鉴定。其分离步骤可参考图9-1-3，主要包括预增菌、增菌、分离培养、鉴定等步骤。(https://www.daowen.com)

弯曲菌属中大多数菌具有较为相似的培养及染色镜检特性，区别鉴定需要依靠生化试验（表9-1-1）。最常见、也是较难区分的两种为空肠弯曲菌和结肠弯曲菌，最可靠的试验是马尿酸钠水解试验。

（2）PCR 分型检测技术：弯曲菌属的分离鉴定相对容易，但同属不同菌的分离鉴定相对较为复杂，往往要通过多种生化试验才能确定，但随着分子生物学检测技术的发展，PCR分型检测方法得到有效推广应用。多重PCR 分型可快速鉴定弯曲菌属、空肠弯曲杆菌及结肠弯曲杆菌，PCR 引物见表9-1-2。循环参数为94℃预变性10min；94℃变性1min，56℃退火40s，72℃延伸1min，30 个循环；72℃再延伸7min。