鸡毒支原体（M.gallisepticum，MG）
又名禽败血支原体，引起鸡和火鸡等多种禽类慢性呼吸道疾病。
1.形态染色
卵球形、短杆状为主的多形性，直径0.2～0.5µm，细胞的一端或两端具有“小泡”极体（图10-1-2）。
图11-1-2 鸡毒支原体镜下形态
（a）瑞氏姬姆萨染色形态；（b）透射电镜照片
2.培养特性
（1）培养条件：需氧和兼性厌氧。对营养要求苛刻，一般需10%～20%的灭活猪、牛或马血清。因不同个体猪血清差异大，常将几种动物血清混合使用。常用Frey 氏培养基，需加入醋酸铊和青霉素抑制杂菌的生长。
（2）常用培养基上的生长形态：固体培养基经3～10 天可形成细小菌落，在低倍显微镜下观察到边缘光滑、半透明、中央有颜色较深且致密的乳头状突起、外周疏松的典型的荷包蛋样菌落，直径0.2～0.3mm，初次分离菌落不典型（图11-1-3）。在液体培养基中加酚红指示剂，37℃经2～5 天呈现轻度混浊乃至均匀混浊。鸡毒支原体可通过接种鸡胚卵黄囊进行培养，在4～10℃至少存活3 个月。
图11-1-3 鸡毒支原体荷包蛋样菌落
3.生化特性
可发酵葡萄糖和甘露醇，可吸附鸡红细胞，但可被相应的抗血清所抑制，详见表11-1-2。生长于固体培养基上的MG 菌落，在37℃可吸附鸡的红细胞。可以在固体培养基表面滴数滴0.25%鸡红细胞液，静置15min，倾去红细胞液，生理盐水轻洗2～3 次后在低倍镜下观察，可见菌落表面吸附有多量红细胞。
4.分离鉴定(https://www.daowen.com)
（1）分离培养时，采集眶下窦渗出液、气管、气囊、肺等病料进行病原体分离。培养方法可参照猪肺炎支原体的方法。为提高分离率，可以在培养基中加入一定量的鸡血清和鸡肉汤。
（2）鸡毒支原体PCR 检测
① 模板制备：取1ml 待检的气管棉拭子PBS 液体于离心管中，14 000r/min 离心30min，弃上清，沉淀用25µl 无菌去离子水重悬；100℃水浴10min，冰浴10min，14 000r/min 离心5min；收集上清，即为PCR 模板，-20℃保存备用。
② 鸡毒支原体引物序列：
MG-14F：5′-GAG CTA ATC TGT AAA GTT GGT C-3′
MG-13R：5′-GCT TCC TTG CGG TTA GCA AC-3′
③ 扩增体系：premix 12.5µl，ddH2O 9.5µl，引物各0.25µl，模板2.5µl。
扩增条件：94℃预热5min；94℃30s，55℃30s，72℃1min，扩增40 个循环；72℃延伸5min。扩增长度为185bp。