鹦鹉热亲衣原体(P.psittaci)
鹦鹉热亲衣原体(P.psittaci)广泛分布于世界各地,可引起家禽、鸟类和人发病。由鹦鹉热亲衣原体引起的禽衣原体病(Avian Chlamydiosis,AC)是以呼吸道和消化道病变为特征的一种急性或慢性传染病,可对养禽业和公共卫生安全带来严重危害,是世界动物卫生组织(WOAH)规定必报告的动物传染病。
鹦鹉热亲衣原体由8 个血清型组成(表11-2-2),每个血清型能够感染特定的动物。
表11-2-2 鹦鹉热亲衣原体的血清型及宿主
1.形态染色
鹦鹉热亲衣原体的细胞呈圆形或椭圆形,直径0.3~0.5µm,无运动能力,革兰染色阴性。细胞壁的结构成分与其他革兰阴性菌相似,脂多糖是构成细胞壁的成分,具有属特异性。细胞质中含有DNA 和RNA,见图10-2-2。
图11-2-2 衣原体结构示意
2.培养特性(https://www.daowen.com)
衣原体是严格细胞内寄生,不能用人工培养基培养,目前培养的方法包括鸡胚或鸭胚培养、细胞培养及动物接种。将衣原体接种于5~7 日龄鸡胚或8~10 日龄鸭胚中,胚胎一般在3~5 天后死亡。此时将卵黄膜涂片镜检,可观察到网状体颗粒、元体和包涵体。培养鹦鹉热亲衣原体常用细胞系有Vero、McCoy、BGM、HeLa 和L929 细胞。
3.分离鉴定
(1)分离鉴定流程:见图11-2-3。
(2)PCR 检测:衣原体的分子生物学检测是近年来发展起来的检测方法,包括PCR 技术和核酸探针技术,靶基因主要选择ompA 基因和16S-23rRNA 基因。在WOAH的《陆生动物诊断试验与疫苗手册》中,提供了一种荧光PCR 方法,该方法可用来检测鹦鹉热衣原体。上游引物:5′-CACTATGTGGGAAGGTGCTTCA-3′,下游引物:5′-CTGCGCGGATGCTAATGG-3′,MGB 探针:FAM-CGCTACTTGGTGTGAC-TAMRA。反应程序是95℃,10min;95℃,15s,45 个循环;60℃,1 分钟。
图11-2-3 鹦鹉热亲衣原体的鉴定流程