高效液相色谱鉴定技术

六、高效液相色谱鉴定 技术

1.设备简介

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)又称高压液相色谱、高速液相色谱、近代柱色谱等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后进入检测器进行检测,从而实现对样品的分析。

2.功能特点

(1)流动相为液体,流经色谱柱时,必须对载液加高压。

(2)分析速度快、载液流速快,通常分析一个样品15~30min。

(3)分离效能高,可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。

(4)紫外检测器可达0.01ng,进样量在µl 数量级,灵敏度高。

(5)应用范围广,70%以上的有机化合物,尤其是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物可用高效液相色谱分析。

(6)柱子可反复使用,用一根柱子可分离不同化合物。

(7)样品量少,样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

3.适用领域

广泛应用于医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域,已成为这些学科领域中重要的分离分析技术。

Agilent 1260 Infinity LC 液相色谱仪

1.设备简介

Agilent 1260 Infinity LC 液相色谱仪(图12-2-11)是一款性能和价值更高标准的液相色谱仪。它提高了HPLC 标准,泵压力为600bar,检测器速率为80Hz,流量最高达5ml/min 下,UV 检测灵敏度提高10 倍。HPLC 和UHPLC 均能兼顾。

图示

图12-2-11 Agilent 1260 Infinity LC

2.功能特点

(1)提高了HPLC 标准,使分离度更高,分离速度更快。

(2)完全兼容HPLC。可以在同一系统上运行已建立并确认的HPLC 方法,也可以提升UHPLC 的性能。

(3)选择多样。能够根据对色谱性能和灵活性的要求恰当地配置需要的系统。

3.适用领域(https://www.daowen.com)

特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物和生物活性物质的分离和分析并且可以做制备。在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域都有着广泛的应用潜力。

Waters Alliance HPLC 系统(高效液相色谱系统)

1.设备简介

Waters Alliance HPLC 系统(图12-2-12)拥有相互独立的两个数控马达驱动的溶剂管理系统,流速精度高。2487 检测器使用了Waters 专利的梯形狭缝池设计,噪音低、灵敏度高、线性宽,内置硝酸铒滤光片,自动校正波长,自动优化灯能量。控制功能强大,适用于LC、GC、CIA、CE、GPC、PDA 及LC-MS 等各种分析使用。内置Oracle 数据库,符合FDA CFR Part 11 的电子签名和电子记录要求。具备升级能力。

2.功能特点

(1)四元溶剂混合支持等度和梯度应用。自动混合技术能够以任何比例混合4 种溶剂,与多种溶剂类型兼容,支持反相、正相、GPC、SEC 和IEX 应用。

(2)溶剂分配功能先进。串联流路具有无脉冲溶剂分配,无需使用湿润器。在线溶剂脱气和溶剂自动压缩使流路准确。集成的密封清洗使操作稳定。

(3)可选择不同的温控环境,进样针清洗程序可以重新编程。容纳120 个样品瓶,进样体积从0.1µl 到100µl,最高可达到2ml。支持STAT 样本和自动添加功能。

(4)可选择色谱柱加热功能或加热/冷却功能。通过根据需要配置的色谱柱切换功能可以运行多种方法。

图示

图12-2-12 Waters Alliance HPLC

(5)LCD 大屏幕,用户界面直观,用户可以快速访问系统设置。利用System PREP 简化日常设置。

(6)支持Empower、Mass Lynx 软件和多款第三方软件包,满足合规性要求。Alliance HPLC 系统支持基于Waters Empower 的自动化系统认证工具(SQT),可以最大程度缩减年度认证的时间和成本。

3.适用领域

特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物和生物活性物质的分离和分析,并且可以做制备。广泛应用于在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域。

Thermo UltiMate3000 HPLC

1.设备简介

UltiMate3000 HPLC(图12-2-13)处理样品通量高,双泵系统以串联或并联的方式工作,符合已有的认证方法;切换装置方便,可快速调整到所需的流速范围;2 维或多维液相具有更高的灵敏度和分辨率。

UltiMate3000 HPLC 按照不同的流速范围(纳升到半制备)以及不同的应用目的(常规分析、蛋白质组学研究、样品半制备)可有7 种单泵系列组合和5 种双泵组合方式。

图示

图12-2-13 UltiMate3000 HPLC

2.功能特点

(1)UltiMate3000 HPLC 色谱系列提高了HPLC 的分辨率、灵敏度、速度、精度和可靠性;通过双通道串联和并联运行,工作能力获得提高;在线SPE-LC 可用于全自动样品制备;2D-LC 可用于复杂样品的分离。

(2)UltiMate3000 HPLC 采用可组合模块,满足宽范围的应用。对蛋白质组学,可以快速调整为微量、毛细管或纳升分析柱的液相色谱;对微孔LC/MS,可以在梯度分析时系统死体积小于100µl;对分析和半制备,可以提供精细调节的泵、自动进样器和检测灵敏度。

(3)UltiMate3000 HPLC 操作更加容易,启动和停机由系统完成,软件全自动跟踪所有临界参数并在干扰和错误发生时提示用户。

3.适用领域

特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物与生物活性物质的分离和分析,并且可以做制备。广泛应用在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域。