八、尿碘试验

八、尿碘试验

尿碘浓度是反映群体碘营养状况最主要的指标。碘生物学效应很高,约90%摄入碘都经肾排出,因此尿碘浓度可评价近期摄入碘量多少。随着妊娠进展,尿碘浓度中位数从183.6μg/L降至104.2μg/L,可能与妊娠肾小球滤过率增加有关,推荐采用尿碘/尿肌酐(UI/Cr)评价妊娠妇女24h碘摄入和循环碘水平,碘足量地区妊娠早期妇女尿碘浓度上限以不超过250μg/L为宜[53]

方法:约40mL的晨尿装入干净的容器中,并送入实验室进行检测。相对于晨尿测定结果来说,24h尿标本检测结果可能更精确,但对于大型研究或流行病学调查来说,测定24h尿标本尿碘浓度并不实际。在收集尿液过程中,防止标本污染很重要。不推荐使用防腐剂,如果没有明显的蒸发现象,尿碘浓度相对比较稳定。在运输的过程中需要冷藏尿标本,在进行分析之前可以冷冻标本1个月或更长时间,不推荐长时间将尿液标本置放于室温当中,特别是室内温度较高时,这可能导致尿液中滋生细菌和真菌,使尿液的pH发生改变,影响试验的精确度。如不能冷藏尿液,应将尿液标本储存在密封容器中,并将其置于阴凉处。在这种情况下,必须在1周之内对尿液标本进行检测。检测尿碘最主要的检测方法是砷铈催化分光光度计检测法,以下分别介绍几种常用的尿碘检测方法。

1.砷铈催化分光光度计检测法:该法是我国尿碘的标准化检测方法(国标WS/T107—1999),统一用于国内人群碘营养状况评估,以确保试验的准确性、可比性。主要原理是:将尿液样本经氯酸在100~115℃消化后,利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用,反应中碘含量越高,反应速度越快,越多Ce4+还原为了Ce3+。再于405nm波长下检测体系中剩余Ce4+的吸光度可间接定量尿碘含量。氯酸溶液不规范是造成每批配置后的标准曲线变异很大的原因,因此必须按照方法要求规范进行氯酸配制,消化过程、砷铈反应的温度、时间控制、尿液样本的保存也是确保试验准确性的重要条件。但此法在消化时会产生有害气体,还有爆炸风险。鉴于这些问题,我国尿碘测定方法进行了修订(国标WS/T107—2006),主要修订内容如下:①采用过硫酸铵溶液取代氯酸消化尿液标本,减少了消化过程中分解释放有害气体。②该试验可在20~35℃之间某一温度条件下进行。③完善了原标准中的某些规定[54]

2.电感耦合等离子体质谱法(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP-MS): ICP-MS是快速定量尿碘的重要方法,灵敏度高、特异性强,已被我国确认为检测尿碘的推荐方法。具体操作方法是:移取尿液样本稀释、混匀,再准确移取一定浓度的碘标准溶液与四甲基氢氧化铵配制成不同浓度的标准溶液,然后将该标准溶液与尿液样本混合配制成相应浓度的标准工作溶液,用电感耦合等离子体质谱仪检测即可。该方法操作简单、技术先进,通常视作尿碘检测的金标准。(https://www.daowen.com)

3.微板法(Microplate Method):首先在微板上过硫酸铵消化去除干扰物质,在110℃条件下加热60min,然后将该样本转移至另一微板上,在25℃条件下进行Sandell-Kolthoff反应30min,然后通过酶标仪读取尿碘浓度。该方法检测结果可靠,有研究表明,微板法与ICP-MS检测尿碘结果相关性良好[54]

4.半定量检测:该方法是一种快速尿碘检测方法,操作简单、价格便宜,适合于流行病学调查。但通过这种方法只能得出碘浓度范围,不能提供具体值。

临床意义:目前碘营养调查主要针对孕妇和儿童。孕妇不仅要满足自身对碘的生理需求,还要供给胎儿足量的碘,碘缺乏可诱发低甲状腺素血症,后者与胎儿神经功能、智力发育受损显著相关,筛查孕妇不同妊娠时期尿碘水平有助于早期科学干预碘营养水平,保证胎儿正常脑发育。碘缺乏病、缺铁性贫血、维生素A缺乏症并列为世界卫生组织联合国儿童基金会等国际组织重点防治、限期消除的三大微营养缺乏病,筛查儿童尿碘水平对于促进儿童健康有重大意义。另外,当发生肿瘤时,甲状腺细胞过度增殖,细胞对碘的摄取和处理能力增强,因此在甲状腺肿瘤中,可以通过检测尿碘反应肿瘤发生发展趋势。有研究显示泰国20年间碘缺乏病减少,乳头状甲状腺癌发病率增加,滤泡状甲状腺癌发病率降低,这表明碘营养状况还可能改变甲状腺癌的致癌作用[18,25-26]