5.4.3 花药和花粉单倍体植株的染色体加倍
花药和花粉单倍体植株有自然加倍的可能,但加倍的频率通常很低,因此,一般还需对鉴定出的花药和花粉单倍体植株进行人工加倍。花药和花粉单倍体染色体加倍最常用的是秋水仙素加倍法。
1)常规条件下处理
用0.02%~0.4%秋水仙素处理花药和花粉单倍体植株,处理方式和部位根据植物种类而定,禾本科植物的处理应在分蘖期进行,将分蘖节以下部分浸泡在0.1%左右秋水仙素溶液中2~3天。处理后用流水冲洗0.5 h,然后栽入土中,以后从结实获得的植株中鉴定出加了倍的材料。木本植物用浸透0.1%~0.4%的秋水仙素的棉球放置在植株顶芽和腋芽生长点处,一般处理2~3天,处理期间要注意添加药液,以后从处理过的顶芽和腋芽萌发出的枝条中,鉴定出加倍的材料,并采用适当的方法,分离和繁殖出来。(https://www.daowen.com)
2)组织培养条件下处理
常用的方法有两种:一是在培养基中加入秋水仙素进行培养;二是在培养过程中单独用秋水仙素溶液浸泡培养材料然后置于不含秋水仙素的培养基中培养。单独用秋水仙素溶液处理培养材料,一般采用的浓度范围为0.01%~1.0%,时间范围为数小时至数天;而在培养基添加秋水仙素的处理方式中,秋水仙素浓度一般为每升几毫克至几百毫克。从经过处理的材料中鉴定出已加倍的植株。