6.2.1 胚培养的方法
1)成熟胚培养
成熟胚培养只需极简单的培养基,即含无机盐和糖的培养基,对营养条件的要求不严格,主要用于繁殖不易萌发的植物,或研究胚和胚乳以及子叶的关系等。成熟胚储有丰富的营养,在简单的培养基上即可培养,方法比较简单。将受精后成熟或未成熟种子或果实用70%酒精表面消毒,再用0.1%升汞溶液或饱和漂白粉溶液消毒,无菌水反复冲洗。在无菌操作台上,直接或在解剖镜下剥取胚接种在培养基上,常规条件培养即可,如图6.2所示。

图6.2 胚培养过程(https://www.daowen.com)
2)幼胚培养
未成熟幼胚完全是异养的,离体条件下培养要求培养基成分复杂,培养不易成功。但随着对离体胚营养需要的了解,Van Overbeek在培养基中加入了CM、麦芽提取液等天然复合物,使0.1~0.2 mm的早期原胚能发育成植株。胚龄越小,要求培养基组成也越复杂,见表6.1。目前幼胚培养也仅限于大麦、烟草、荠菜等少数植物。幼胚培养在具体做法上与成熟胚培养基本相同,但幼胚剥离必须在高倍解剖镜下进行,操作难度大,技术要求高。
表6.1 荠菜不同发育时期胚培养的营养需要
