9.4.4 微囊培养系统
微囊技术是指在无菌条件下,将活细胞悬浮于海藻酸钠溶液中,通过特制的成滴器将含有细胞的悬液形成一定大小的小滴,滴入氯化钙溶液中,形成内含活细胞的凝胶小珠。然后将凝胶小珠用多聚赖氨酸包被,形成坚韧、多孔可通透的外膜。再用柠檬酸等处理,重新液化凝胶小珠,使其成胶物质从多孔膜流出,活细胞留在多孔外膜内,即可放入适当的培养系统(如气升式培养系统)中进行培养。(https://www.daowen.com)
微囊内的活细胞由于有半透性微囊外膜保护,可以防止搅拌和直接通气对细胞的损伤。营养物质和氧气能通过多孔外膜进入囊内,供细胞生长所需;细胞代谢的小分子产物可排出囊外。细胞分泌的大分子产物如IgG,因不能透过膜孔而积聚在囊内。因此囊内细胞密度可以很大,细胞分泌产物含量高。产物分离纯化也较方便,只需收集培养过的微囊,离心沉淀,用BSS洗涤,除去粘附的培养液,再用生理盐水洗涤后采用物理方法破碎小珠,离心去除微囊碎片及细胞,抗体便留在上清液中,此抗体经过纯化后可得到95%以上纯度的产品。但微囊制作过程较复杂,成功率不高,培养液用量大,囊内部分死亡的细胞会污染产物等问题还有待进一步改进。