思考题

思考题

1.优秀的质粒载体必须具备哪些基本特征和结构？

2.遗传标记基因在基因工程载体中承担哪些功能？

3.如何理解质粒的不相容性及其发生机制？

4.质粒载体从功能角度可以分为哪几类？

5.在获得理想人工质粒载体过程中，如何对天然质粒进行改造？

6.如何理解T载体的T-A克隆过程和蓝白斑筛选过程？

7.质粒中抗性标记基因在载体中承担什么功能？请举例说明其工作原理。

8.pET28a载体中的His标签具有什么功能？

9.pcDNA3.1-V5/His载体中的V5标签具有什么功能？

10.如何利用pEGFP-N1或pEGFP-Cl载体进行目的基因的亚细胞定位分析？

11.如何获得未知DNA片段的核苷酸序列信息？

12.将目的基因连接入pEGFP-N1构建目的基因和GFP蛋白融合表达载体时如何保证不发生移码？

13.穿梭载体如何实现在不同宿主细胞中的自主复制和转化子筛选？

14.烈性噬菌体如何利用宿主细胞进行增殖？

15.如何理解λ噬菌体的体外包装原理？cos位点在噬菌体增殖过程中有什么功能？

16.对比λ噬菌体和M13噬菌体增殖过程的差异和相似性。

17.请阐述噬菌体展示技术的原理。

18.柯斯质粒、噬菌粒载体和噬菌体载体相比较，它们各有哪些优缺点？

19.目前常用于基因治疗的病毒载体包含哪几类？

20.用于真核细胞基因转移和基因治疗的病毒载体和传统质粒载体相比，有何优势？

21.目前常用的人工染色体包括哪几类？其外源DNA承载能力如何？人工染色体载体有何优势？

22.稳定的人工染色体载体必须具备哪些组件？各种组件的功能分别是什么？