5.1.1 DNA合成原理

5.1.1 DNA合成原理

由于核苷酸是多官能团的化合物,在连接反应中除了特定的基团会发生反应外,其他如核糖和磷酸羟基、碱基上的氨基等基团也会参加反应产生错接等,导致真正需要的产物的产率降低并且影响产物的分离纯化。因此,在DNA的化学合成中总是将暂时不需要的基团保护起来,并且在下一轮缩合反应之前将这些保护基有选择地除去,这样不断迅速形成专一的3',5'-磷酸二酯键连接的特定核苷酸序列。DNA的化学合成有磷酸二酯法、磷酸三酯法和亚磷酸三酯法这三种方法,有液相合成和固相合成这两种形式。固相亚磷酸三酯法是目前已广泛应用的一种方法,DNA自动合成仪就是采用固相亚磷酸三酯法原理设计的。