细胞的分离与纯化

想要了解某一种细胞的生命活动过程，常常需要大量的同种细胞，因此需要从组织中分离和纯化目的细胞，并在体外进行培养。细胞的分离、纯化与培养是细胞生物学的基本研究技术，也是细胞生物学前沿领域（如干细胞、细胞工程等）研究和应用的实验基础。(https://www.daowen.com)

利用细胞的物理学和生理学特性，并基于不同的实验目的，可以将目的细胞从实体组织或悬液组织中分离出来。从实体组织中分离活细胞的第一步是将实体组织制备成游离的细胞悬液。通常先将实体组织剪成小块，然后采用机械法（如细切、通过筛网、用力吹打）和酶解法就可以得到游离的细胞悬液。酶解法主要是用胰蛋白酶和胶原酶去除细胞间连接和细胞外基质，用金属离子螯合剂（如EDTA和EGTA）去除细胞黏着所依附的钙离子。当实体组织的结构变得松散后，采用离心分离技术、免疫磁珠技术、流式细胞技术、激光捕获显微切割技术等实验手段，就能获得单细胞悬液。离心分离技术利用细胞的物理学和生物学特性，可以方便有效地分离和筛选细胞；免疫磁珠技术可以获得高纯度的细胞类型；流式细胞技术可以准确地分离带荧光标记的细胞，若进一步利用激光捕获显微切割技术，可以从组织切片中精确地分离单一细胞。