【实验原理】
更新于 2026年10月15日
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【实验原理】
真核细胞胞质中错综复杂的纤维网络称为细胞骨架(cytoskeleton),纤维按直径、组成成分和组装结构的不同分为微丝(microfilament,MF)、微管(microtubule,MT)和中等纤维(intermediate filament,IF),直径分别为5~7 nm、20~25 nm和8~11 nm。此外,胞质中还散布着一些3~6 nm的细小纤维。
微丝是肌动蛋白亚单位组成的螺旋状纤维,称为纤维状肌动蛋白(fibrous action,Factin)。在不同种类的细胞中,微丝与某些结合蛋白一起形成不同的亚细胞结构,如张力纤维、肌肉细丝、肠上皮绒毛轴心等。观察微丝可以用电子显微镜、组织化学、免疫细胞化学等方法,本实验用考马斯亮蓝R250显示微丝组成的张力纤维。张力纤维在体外培养的细胞中普遍存在,其与细胞对基质的附着、维持细胞扁平铺展的形状有关。活体内有关细胞张力纤维的研究较少。目前比较明确的是,一些可迅速运动的细胞(如巨噬细胞、变形虫等)缺乏张力纤维。张力纤维的组成除了肌动蛋白外,还有α-辅肌动蛋白、肌球蛋白和原肌球蛋白沿着纤维轴周期性地分布着,类似于肌原纤维的组织分布,具有收缩功能。(https://www.daowen.com)
考马斯亮蓝R250是一种普通的蛋白质染料,它可以使各种细胞骨架蛋白着色,并非特异地显示微丝,但是由于有些细胞骨架的纤维(如微管)在该实验条件下不够稳定,还有些类型的纤维太细,在光学显微镜下无法分辨。因此,我们看到的主要是微丝组成的张力纤维,直径约40 nm。张力纤维形态长而直,常常与细胞的长轴平行并贯穿细胞全长。