【实验方法】
1.细胞培养在盖玻片上,生长密度达++~+++时取出,用PBS液轻轻涮洗。
2.用1%Triton X-100/M-缓冲液处理15 min,室温或37℃均可。Triton X-100是非离子型表面活性剂(去污剂),能增加细胞膜通透性并抽提部分杂蛋白质,使细胞骨架图像更清晰。
3.M-缓冲液轻轻洗细胞3次。M-缓冲液有稳定细胞骨架的作用。
4.3%戊二醛-PB液固定细胞5~15 min。(https://www.daowen.com)
5.PBS液洗细胞若干次,多余液体用滤纸吸干。
6.0.2%考马斯亮蓝R250染片30 min,小心地用水漂洗后置于空气中晾干。
6.直接观察或用树脂封片。