【实验用品】
一、材料
培养在盖玻片上的动物细胞。
二、试剂(https://www.daowen.com)
0.01 mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS,p H=7.3),PEM缓冲液(80 mmol/L pipes、1 mmol/L EGTA、0.5 mmol/L MgCl2),PEMD缓冲液[含1%二甲基亚砜(DMSO)的PEM缓冲液],PEMP缓冲液[含4%聚乙二醇(PEG,MW=6 000)的PEM缓冲液],固定液(3.7%甲醛-PEMD溶液),0.5%Triton X-100/PEMP溶液,1%和0.3%的Triton X-100/PBS溶液,兔抗微管蛋白抗体(一抗)和FITC-羊抗兔抗体(二抗)(使用前用0.3%Triton X-100/PBS或直接用PBS稀释20倍以上,一般一抗的稀释度更高,最好在使用前试验出最佳稀释度,以特异性染色反应荧光最强而非特异性染色阴性为最佳),甘油-PBS(9∶1)(p H=8.5~9.0)。
三、器材
荧光显微镜、冰箱、毛细吸管、放有湿纱布的铝盒、载玻片、35 mm小染色缸、振荡器、指甲油。