3.精液稀释
精液稀释的目的是扩大精液总量,增加输精母兔只数,同时也是为了延长精子存活时间。
(1)稀释液。主要有以下几类成分:
1)营养成分:常用果糖、山梨醇、甘油磷酸胆碱(GPC)和磷脂给精子提供营养。
2)缓冲物质:常用柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠等,保持精液适当的pH值。
3)防冷击保护剂:常用的有卵磷脂、卵黄、蛋白胨等,提供营养并防止冷冻中死亡。
4)制菌物质:常用青霉素、链霉素,防止微生物污染。(https://www.daowen.com)
表5.2中列出了家兔精液稀释液几个配方实例,可参考使用。
(2)稀释方法。稀释操作时,把35℃左右的稀释液沿集精管壁,缓慢地倾注到精液中,注入后用玻璃棒轻轻搅动,使其均匀混合,避免用力摇动或振荡;稀释液的温度要与精液等温,保持在25~30℃。现稀释现用的精液保存在30℃左右的环境中即可;若存放4~8小时,可保存在15~20℃的室温中;需长时间保存时,要先缓慢降低温度,再放入冰箱或其他代用物保持在0~5℃的环境中。
通常情况下,精液以稀释5~9倍为宜(精子密度高者也可稀释20倍),保持每毫升稀释后的精液内有1 000万个活力旺盛的精子。稀释后的精液应做一次显微镜检查,发现精子活力不强或死亡过多则不能用作输精。
表5.2 家兔精液稀释液配方实例
