【实验方法与步骤】
1.准备恒温平滑肌槽
恒温平滑肌槽(图9-1)分为内槽、外槽。外槽(麦氏浴槽)内水温度恒定在38℃。内槽(浴管)是一个允许台氏液循环的玻璃管。浴管底部有通空气和排液的共用口,一方面用充满O2的球胆经胶管缓慢地向浴管底部通O2,另一方面可排出浴液,以便在每次加药前及时更换38℃新鲜台氏液。
2.制备离体小肠标本
将家兔用20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉后,打开腹腔,在胃与十二指肠交界处用线结扎,将与肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,在近胃侧剪断肠管,向下取出约20cm长的肠管。将离体肠管在4℃左右的台氏液中洗净,用注射器抽取台氏液冲洗肠腔,然后将肠管剪成2~3cm长的小段,浸泡于4℃台氏液中备用。

图9-1 恒温平滑肌槽工作示意图
3.仪器连接与调试
(1)取一段制备好的肠段,两端用线结扎,一端系于麦氏浴槽内玻璃管的标本固定钩上,另一端系于张力换能器上,适当调节张力换能器的高度,使肠段勿过紧或过松。注意勿与周围管壁接触。张力换能器的输入端与BL-420I系统的通道1相连。
(2)启动BL-420I系统,选择“实验模块”→“消化”→“消化道平滑肌的生理特性”,记录离体小肠平滑肌的收缩曲线。(https://www.daowen.com)
4.观察项目
(1)记录离体肠段在38℃新鲜台式液中的收缩曲线。注意观察收缩的频率和收缩的幅度。
(2)在槽内加入1~2滴10-4乙酰胆碱溶液,观察小肠收缩有何变化。待作用效果出现后,立即用38℃新鲜台氏液冲洗,使小肠收缩恢复正常。
(3)加入1~2滴10-4肾上腺素溶液,待作用效果出现后,迅速按上法冲洗。
(4)用滴管加2%CaCl2溶液2~3滴,观察平滑肌收缩活动的变化;待作用效果明显后,经38℃新鲜台氏液反复冲洗3次,待平滑肌节律收缩恢复稳定后,进行下一项观察。
(5)加入2~3滴1mol/L HCl溶液,观察小肠收缩情况,冲洗肠段,使其恢复正常。
(6)加入2~3滴1mol/L NaOH溶液,观察小肠收缩变化,出现变化后立即冲洗,使其恢复正常。
(7)将麦氏浴槽水浴温度降低至25℃,观察小肠收缩情况,再将温度升至38℃,观察小肠收缩情况。