附录A 微生物实验实训室常用培养基

更新于 2026年10月10日 版权声明

附录A 微生物实验实训室常用培养基

1.牛肉膏蛋白胨琼脂培养基

牛肉膏     3.0g

蛋白胨     10.0g

氯化钠     5.0g

琼脂       20.0g

蒸馏水     1000mL

pH     7.4~7.6

121℃灭菌20min。

琼脂    用量可随品牌不同、温度高低而适当增减。冬天减,夏天增,下同。

2.LB(Luria-Bertani)培养基

胰蛋白胨    10.0g

酵母浸出粉   5.0g

氯化钠       5.0g

葡萄糖       1.0g

酵母膏       2.0g

琼脂         20.0g

蒸馏水       1000mL

pH       7.4~7.6

121℃灭菌20min。

3.半固体肉汤蛋白胨培养基(观察细菌动力用)

牛肉膏      3.0g

蛋白胨      10.0g

氯化钠      5.0g

琼脂        4.0g

蒸馏水      1000mL

pH      7.4~7.6

121℃灭菌20min。

配制时,最好先用脱脂棉过滤,然后再分装于试管中,灭菌,这样有利于观察实验结果。

4.肉浸液肉汤培养基

蛋白胨      10.0g

磷酸氢二钾    2.0g

搅碎牛肉   200.0g

氯化钠      5.0g

蒸馏水      1000mL

pH   7.4~7.6

121℃灭菌20min。

制法:取新鲜牛肉用刀剔除膜筋腱和脂肪,然后切成小块;称取碎肉200g,加蒸馏水1000mL,搅拌混合后,置4℃冰箱中过夜,使营养物质浸出;次日取出,除去液面的浮油,加热煮沸0.5h,使肉渣全部凝固,以便于过滤后取得澄清的牛肉浸液;将上清液部分倾入锥形瓶,然后将肉渣用双层纱布过滤,尽量挤净其中的液体,加蒸馏水补足至1000mL;加入氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾,溶解后校正pH,分装锥形瓶或试管,121℃高压蒸汽灭菌20min。

5.普通营养琼脂培养基

牛肉膏   3.0g

蛋白胨   10.0g

氯化钠   5.0g

琼脂    15.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.2~7.4

121℃灭菌20min。

6.基本培养基(minimal medium)

葡萄糖   5.0g

磷酸氢二钾  4.0g

磷酸二氢钾  6.0g

硫酸铵   2.0g

柠檬酸钠  1.0g

硫酸镁   0.2g

蒸馏水   1000mL

pH   7.0~7.2

121℃灭菌20min。

7.钾细菌培养基

甘露醇(或蔗糖)10.0g

磷酸氢二钾  0.5g

硫酸镁   0.2g

氯化钠   0.2g

硫酸钙   0.2g

碳酸钙   1.0g

琼脂    20.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.4~7.6

121℃灭菌30min。

8.察氏琼脂培养基

硝酸钠   3.0g

磷酸氢二钾  1.0g

氯化钾   0.5g

硫酸镁   0.5g

硫酸亚铁  0.01g

蔗糖    30.0g

琼脂    20.0g

蒸馏水   1000mL

pH    自然

121℃灭菌20min。

9.马铃薯蔗糖(葡萄糖)琼脂培养基

马铃薯200.0g

蔗糖    (葡萄糖)20.0g

琼脂    20.0g

蒸馏水   1000mL

pH    自然

121℃灭菌20min。

如用葡萄糖,应为115.6℃灭菌20min。

10.高氏Ⅰ号(Cause’sⅠ)琼脂培养基

可溶性淀粉  20.0g

磷酸氢二钾  0.5g

硫酸亚铁  0.01g

氯化钠   0.5g

硫酸镁   0.5g

硝酸钾   1.0g

琼脂    20.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.2~7.4

121℃灭菌20min。

11.麦芽汁培养基

1)用大麦自制麦芽汁

(1)取大麦(或小麦)若干,用水洗净,浸水6~12h,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,麦根生长至麦粒两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,储存备用。

(2)将干麦芽磨碎,1份麦芽加4份水,在65℃恒温水浴锅中糖化3~4h。将糖化液用4~6层纱布过滤,将稀释液调到4~6°Bé,pH约6.4,加入2%琼脂,121℃灭菌20min。

2)从啤酒厂购买来的麦芽汁

取从啤酒厂购买来的原液,加水稀释到4~6°Bé,pH约6.4,加入2%琼脂,121℃灭菌20min。

12.饴糖培养基(适于酵母菌生长)

将饴糖加水稀释至5~6°Bé,加入2%琼脂,pH 6.4,121℃灭菌20min。

13.乳糖胆盐培养基

蛋白胨   20.0g

氯化钠   5.0g

磷酸氢二钾  4.0g

磷酸二氢钾  1.3g

牛胆盐   1.3g

乳糖    5.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.4

115.6℃灭菌30min。

14.单糖发酵培养基(https://www.daowen.com)

蛋白胨   10.0g

氯化钠   5.0g

糖(葡萄糖、乳糖等) 5.0g

0.4%溴麝香草酚蓝(BTB)溶液 6mL

蒸馏水   1000mL

pH   6.8~7.0

115.6℃灭菌 30min。

15.伊红美蓝琼脂

普通营养琼脂 1000mL

乳糖    10.0g

2%伊红水溶液 20mL

0.5%美蓝水溶液 60mL

115.6℃灭菌30min。

16.蛋白胨水培养基

蛋白胨   10.0g

氯化钠   5.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.4~7.6

121℃灭菌20min。

17.葡萄糖蛋白胨水培养基

蛋白胨   5.0g

葡萄糖   5.0g

磷酸氢二钾  5.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.4~7.6

115.6℃灭菌30min。

18.乳酸细菌培养基

蛋白胨   10.0g

牛肉膏   10.0g

酵母膏   5.0g

碳酸钙   2.0g

葡萄糖   20.0g

吐温    80 1mL

乙酸钠  5.0g

柠檬酸铵  2.0g

磷酸氢二钾  2.0g

硫酸镁   0.5g

硫酸锰   0.5g

琼脂    15.0g

蒸馏水   1000mL

pH   6.2~6.6

115.6℃灭菌30min。

19.西蒙斯氏柠檬酸盐培养基

氯化钠   5.0g

硫酸镁   0.2g

磷酸氢二钾  1.0g

磷酸二氢铵 1.0g

柠檬酸钠  2.0g

琼脂    20.0g

1%溴麝香草酚蓝水溶液 10mL

蒸馏水   990mL

pH   6.8~7.2

121℃灭菌20min。

将上述成分加热溶解(指示剂除外),调pH至7.0,再加入指示剂,摇匀,成淡绿色。然后分装试管,121℃灭菌20min,摆成斜面。

20.柠檬酸铁铵培养基

1)配方1

蛋白胨   20.0g

氯化钠   5.0g

柠檬酸铁铵  0.5g

硫代硫酸钠  0.5g

琼脂    15.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.4

121℃灭菌20min。

2)配方2

1.5%肉汤琼脂1000mL

柠檬酸铁铵  (棕色)0.5g

硫代硫酸钠  0.5g

pH   7.4

121℃灭菌20min。

21.明胶液化培养基

牛肉膏   5.0g

蛋白胨   10.0g

氯化钠   5.0g

明胶        200g

蒸馏水   1000mL

pH   7.2

115.6℃灭菌30min。

22.苯丙氨酸培养基

酵母浸膏  3.0g

L-苯丙氨酸 1.0g

磷酸氢二钠 1.0g

氯化钠   5.0g

琼脂    20.0g

蒸馏水   1000mL

pH   7.2~7.4

121℃灭菌20min。

23.乙酸铅培养基

牛肉膏   5.0g

蛋白胨   10.0g

氯化钠   5.0g

硫代硫酸钠  0.25g

5%乙酸铅水溶液 1.0mL

琼脂    15.0g

蒸馏水   1000mL

121℃灭菌20min。

24.巯基乙酸盐培养基

蛋白胨   20.0g

磷酸氢二钾  1.5g

氯化钠   2.5g

巯基乙酸钠  0.6g

亚硫酸钠  0.2g

L-胱氨酸  0.4g

次甲基蓝  0.002g

琼脂    0.5g

蒸馏水   1000mL

pH   7.2~7.4

121℃灭菌20min。

分装试管,高度为试管长度的一半。临用前煮沸数分钟,冷却后使用。

25.通用琼脂粉培养基

氯化钠   50.0g

磷酸氢二钾  25.0g

蛋白胨   100.0g

琼脂    粉   100.0g

将上述成分放在一起,磨细、混匀,装入瓶内,塞紧瓶塞,于干燥处保存备用。

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