附录A 微生物实验实训室常用培养基
附录A 微生物实验实训室常用培养基
1.牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌20min。
琼脂 用量可随品牌不同、温度高低而适当增减。冬天减,夏天增,下同。
2.LB(Luria-Bertani)培养基
胰蛋白胨 10.0g
酵母浸出粉 5.0g
氯化钠 5.0g
葡萄糖 1.0g
酵母膏 2.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌20min。
3.半固体肉汤蛋白胨培养基(观察细菌动力用)
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 4.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌20min。
配制时,最好先用脱脂棉过滤,然后再分装于试管中,灭菌,这样有利于观察实验结果。
4.肉浸液肉汤培养基
蛋白胨 10.0g
磷酸氢二钾 2.0g
搅碎牛肉 200.0g
氯化钠 5.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌20min。
制法:取新鲜牛肉用刀剔除膜筋腱和脂肪,然后切成小块;称取碎肉200g,加蒸馏水1000mL,搅拌混合后,置4℃冰箱中过夜,使营养物质浸出;次日取出,除去液面的浮油,加热煮沸0.5h,使肉渣全部凝固,以便于过滤后取得澄清的牛肉浸液;将上清液部分倾入锥形瓶,然后将肉渣用双层纱布过滤,尽量挤净其中的液体,加蒸馏水补足至1000mL;加入氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾,溶解后校正pH,分装锥形瓶或试管,121℃高压蒸汽灭菌20min。
5.普通营养琼脂培养基
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 15.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2~7.4
121℃灭菌20min。
6.基本培养基(minimal medium)
葡萄糖 5.0g
磷酸氢二钾 4.0g
磷酸二氢钾 6.0g
硫酸铵 2.0g
柠檬酸钠 1.0g
硫酸镁 0.2g
蒸馏水 1000mL
pH 7.0~7.2
121℃灭菌20min。
7.钾细菌培养基
甘露醇(或蔗糖)10.0g
磷酸氢二钾 0.5g
硫酸镁 0.2g
氯化钠 0.2g
硫酸钙 0.2g
碳酸钙 1.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌30min。
8.察氏琼脂培养基
硝酸钠 3.0g
磷酸氢二钾 1.0g
氯化钾 0.5g
硫酸镁 0.5g
硫酸亚铁 0.01g
蔗糖 30.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 自然
121℃灭菌20min。
9.马铃薯蔗糖(葡萄糖)琼脂培养基
马铃薯200.0g
蔗糖 (葡萄糖)20.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 自然
121℃灭菌20min。
如用葡萄糖,应为115.6℃灭菌20min。
10.高氏Ⅰ号(Cause’sⅠ)琼脂培养基
可溶性淀粉 20.0g
磷酸氢二钾 0.5g
硫酸亚铁 0.01g
氯化钠 0.5g
硫酸镁 0.5g
硝酸钾 1.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2~7.4
121℃灭菌20min。
11.麦芽汁培养基
1)用大麦自制麦芽汁
(1)取大麦(或小麦)若干,用水洗净,浸水6~12h,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,麦根生长至麦粒两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,储存备用。
(2)将干麦芽磨碎,1份麦芽加4份水,在65℃恒温水浴锅中糖化3~4h。将糖化液用4~6层纱布过滤,将稀释液调到4~6°Bé,pH约6.4,加入2%琼脂,121℃灭菌20min。
2)从啤酒厂购买来的麦芽汁
取从啤酒厂购买来的原液,加水稀释到4~6°Bé,pH约6.4,加入2%琼脂,121℃灭菌20min。
12.饴糖培养基(适于酵母菌生长)
将饴糖加水稀释至5~6°Bé,加入2%琼脂,pH 6.4,121℃灭菌20min。
13.乳糖胆盐培养基
蛋白胨 20.0g
氯化钠 5.0g
磷酸氢二钾 4.0g
磷酸二氢钾 1.3g
牛胆盐 1.3g
乳糖 5.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4
115.6℃灭菌30min。
14.单糖发酵培养基(https://www.daowen.com)
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
糖(葡萄糖、乳糖等) 5.0g
0.4%溴麝香草酚蓝(BTB)溶液 6mL
蒸馏水 1000mL
pH 6.8~7.0
115.6℃灭菌 30min。
15.伊红美蓝琼脂
普通营养琼脂 1000mL
乳糖 10.0g
2%伊红水溶液 20mL
0.5%美蓝水溶液 60mL
115.6℃灭菌30min。
16.蛋白胨水培养基
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
121℃灭菌20min。
17.葡萄糖蛋白胨水培养基
蛋白胨 5.0g
葡萄糖 5.0g
磷酸氢二钾 5.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4~7.6
115.6℃灭菌30min。
18.乳酸细菌培养基
蛋白胨 10.0g
牛肉膏 10.0g
酵母膏 5.0g
碳酸钙 2.0g
葡萄糖 20.0g
吐温 80 1mL
乙酸钠 5.0g
柠檬酸铵 2.0g
磷酸氢二钾 2.0g
硫酸镁 0.5g
硫酸锰 0.5g
琼脂 15.0g
蒸馏水 1000mL
pH 6.2~6.6
115.6℃灭菌30min。
19.西蒙斯氏柠檬酸盐培养基
氯化钠 5.0g
硫酸镁 0.2g
磷酸氢二钾 1.0g
磷酸二氢铵 1.0g
柠檬酸钠 2.0g
琼脂 20.0g
1%溴麝香草酚蓝水溶液 10mL
蒸馏水 990mL
pH 6.8~7.2
121℃灭菌20min。
将上述成分加热溶解(指示剂除外),调pH至7.0,再加入指示剂,摇匀,成淡绿色。然后分装试管,121℃灭菌20min,摆成斜面。
20.柠檬酸铁铵培养基
1)配方1
蛋白胨 20.0g
氯化钠 5.0g
柠檬酸铁铵 0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
琼脂 15.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4
121℃灭菌20min。
2)配方2
1.5%肉汤琼脂1000mL
柠檬酸铁铵 (棕色)0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
pH 7.4
121℃灭菌20min。
21.明胶液化培养基
牛肉膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
明胶 200g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2
115.6℃灭菌30min。
22.苯丙氨酸培养基
酵母浸膏 3.0g
L-苯丙氨酸 1.0g
磷酸氢二钠 1.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2~7.4
121℃灭菌20min。
23.乙酸铅培养基
牛肉膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.0g
硫代硫酸钠 0.25g
5%乙酸铅水溶液 1.0mL
琼脂 15.0g
蒸馏水 1000mL
121℃灭菌20min。
24.巯基乙酸盐培养基
蛋白胨 20.0g
磷酸氢二钾 1.5g
氯化钠 2.5g
巯基乙酸钠 0.6g
亚硫酸钠 0.2g
L-胱氨酸 0.4g
次甲基蓝 0.002g
琼脂 0.5g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2~7.4
121℃灭菌20min。
分装试管,高度为试管长度的一半。临用前煮沸数分钟,冷却后使用。
25.通用琼脂粉培养基
氯化钠 50.0g
磷酸氢二钾 25.0g
蛋白胨 100.0g
琼脂 粉 100.0g
将上述成分放在一起,磨细、混匀,装入瓶内,塞紧瓶塞,于干燥处保存备用。