1)技术指标

测定范围:0.09μmol/dm3～6.4μmol/dm3。

检测下限:0.09μmol/dm3。

准确度:以甘油磷酸钠(C3H7Na2O6P·5 1/2H2O)为标准加入物，其方法回收率为98%～100%；以六偏磷酸钠[(NaPO3)6]为标准加入物，其方法回收率为93%～98%。

精密度:总磷浓度为1μmol/dm3～6.4μmol/dm3时，相对标准偏差为±5%。

2)方法原理

海水样品在酸性和110℃～120℃条件下，用过硫酸钾氧化，有机磷化合物被转化为无机磷酸盐，无机聚合态磷水解为正磷酸盐。消化过程产生的游离氯，以抗坏血酸还原。消化后水样中的正磷酸盐与钼酸铵形成磷钼黄。在酒石酸氧锑钾存在下，磷钼黄被抗坏血酸还原为磷钼蓝，于882nm波长处进行分光光度测定。

3)试剂及其配制

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水或等效纯水。

(1)硫酸溶液:体积分数为17.0%

在水浴冷却和不断搅拌下，将60.0cm3硫酸(H2SO4，ρ＝1.84g/cm3)缓慢加入300.0cm3水中，贮存于玻璃瓶中。

(2)过硫酸钾溶液:ρ＝50.0g/dm3

称取5.0g过硫酸钾(K2S2O8)溶于水中，并用水稀释至100.0cm3，混匀。此溶液在室温避光保存可稳定10.0d；4℃～6℃避光保存可稳定30.0d。

过硫酸钾的试剂空白若达不到要求时，可用多次重结晶方法提纯。

(3)钼酸铵溶液:ρ＝30.0g/dm3

称取15.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶于水中并稀释至500.0cm3，贮于聚乙烯瓶中，避光保存。

(4)抗坏血酸溶液:ρ＝54.0g/dm3

称取5.4g抗坏血酸(C6H8O6)溶于水中并稀释至100.0cm3。此液贮于聚乙烯瓶中，避免阳光直射。有效期为一星期。在5～6℃下低温保存，可稳定一个月。

(5)酒石酸氧锑钾溶液:ρ＝1.4g/dm3

称取1.4g酒石酸氧锑钾(KSbO·C4H4O6·1/2H2O)溶于水中并稀释至1000.0cm3，贮于聚乙烯瓶中，有效期为6个月。

(6)硫酸-钼酸铵-酒石酸氧锑钾混合溶液

依次量取100.0cm3硫酸溶液，40.0cm3钼酸铵溶液，20.0cm3酒石酸氧锑钾溶液，混合均匀。临用时配制。

(7)磷酸盐标准溶液

磷酸盐标准贮备溶液:＝8.0μmol/dm3

称取1.088g磷酸二氢钾(KH2PO4，优级纯，在110℃～115℃烘干2.0h，置于干燥器中冷却至室温)，用少量水溶解后，全量转移至1000.0cm3容量瓶中，用水稀释至标线，加1.0cm3三氯甲烷，混匀。暗处存放，有效期6个月。

磷酸盐标准使用溶液:＝0.08μmol/dm3

移取1.0cm3磷酸盐标准贮备溶液于100.0cm3容量瓶中，用水稀释至标线。加3滴三氯甲烷，混匀，贮存于棕色玻璃瓶中，有效期为24.0h。(www.daowen.com)

4)仪器与设备

①医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅，压力可达到1.1kPa～1.4kPa，温度可达120℃～124℃。

②分光光度计。

③消煮瓶:60.0～100.0cm3，带螺旋盖的聚四氟乙烯瓶或聚丙烯瓶。

实验所用的器皿均应用体积分数为10%盐酸溶液浸泡24.0h后，再用水冲洗干净。

5)测定步骤

(1)标准工作曲线绘制(0～6.4μmol/dm3)

在6个100cm3容量瓶中，分别移入磷酸盐标准使用溶液0cm3、0.5cm3、1.0cm3、2.0cm3、4.0cm3、8.0cm3，用水稀释至标线，混匀。此标准溶液系列的浓度依次为0μmol/dm3、0.4μmol/dm3、0.8μmol/dm3、1.6μmol/dm3、3.2μmol/dm3、6.4μmol/dm3。

在两组各6个消煮瓶中，分别依次移入25.0cm3上述标准溶液系列，各加入2.5cm3过硫酸钾溶液，混匀，旋紧瓶盖。

把上述消煮瓶置于不锈钢丝筐中，放入高压蒸汽消煮器中加热消煮，待压力升至1.1kPa(温度为120℃)时，控制压力在1.1～1.4kPa(温度120～124℃)保持30.0min。然后停止加热，自然冷却至压力为“0”时，方可打开锅盖，取出消煮瓶。

消煮后将水样冷却至室温后，加入0.5cm3抗坏血酸溶液，摇匀，再加入2.0cm3硫酸-钼酸铵-酒石酸氧锑钾混合溶液和0.5cm3抗坏血酸溶液，混匀，显色10.0min后，在分光光度计上，用5.0cm比色池，以水作参比，于882nm波长处测定溶液的吸光值As，其中，空白吸光值为Ab。记录于标准工作曲线数据记录表中。

以扣除空白吸光值Ab后的吸光值An为纵坐标，标准溶液系列的浓度cs为横坐标，绘制标准工作曲线，并用线性回归法求出标准工作曲线的截距a和斜率b。

(2)水样测定

量取25.0cm3海水水样(双样)于消煮瓶中，加入2.5cm3过硫酸钾溶液，混匀，旋紧瓶盖。

以下按前述步骤测定水样吸光值Aw，记录于总磷测定记录表4.15中。

表4.15　总磷测定记录表

(3)批量样品质量检验

检验方法同亚硝酸盐。本方法校正误差Sb不可大于±5.0%。

(4)浑浊度测定

如果水样的浊度对吸光值有影响，应进行浊度校正:取25.0cm3水样按前述步骤，于相同的波长(882nm)处测定水样浊度的吸光值At。

6)计算

水样中总磷浓度可按式(4.24)计算。

式中，c(TP-P)为水样中总磷的浓度，μmol/dm3；为水样中总磷的平均吸光值；At为水样中浊度的吸光值，如果无需浊度校正时，该项为0；Ab为空白吸光值；a为标准工作曲线截距；b为标准工作曲线斜率。

其他指标的测定参考《海洋调查规范　第4部分:海水化学要素调查》(GB/T 12763.4—2007)或有关规范。