Sox9-Cre和Sox9-CreER

Sox9-Cre重组载体是由德州大学分子遗传学科的Akiyama及其同事首次合成的［24］。Sox9-Cre小鼠通过将靶载体同源重组于Sox9基因位点而建立。如图2-7所示，靶载体包括一个7.7kb的小鼠内源性Sox9基因片段，与Cre重组酶结构共同嵌入3号外显子非编码区［25］。Cre重组酶结构与内部核糖体进入位点 (IRES)，粒细胞集落因子聚腺苷酸序列 (G-CFSPA)及含有Lox-FRT位点的PGK-NEO基因表达框相融合。

图2-7　Sox9-Cre转基因结构，Cre的表达由内源性Sox9启动子区域调控

将Cre小鼠与R26报告小鼠杂交可用于验证Sox9-Cre重组酶的表达。X-gal染色显示，早于ED10.5时，Cre就可在肢芽间质中表达；而ED13.5时，软骨原基和软骨膜的所有细胞均显示阳性表达；ED17时，所有的软骨细胞、软骨膜、骨膜和成骨细胞均有β-gal表达，也即是说，Sox9调控的Cre可表达于软骨和成骨细胞系祖细胞中。此外，肌腱和滑膜中也可显示X-gal阳性染色，说明表达Sox9-Cre的间充质细胞可向肌腱和滑膜细胞分化［24］。(https://www.daowen.com)

近年来，Sox9-CreER转基因小鼠也相继建立，并且被用来追踪生长早期表达Sox9基因的细胞 (详见 “细胞命运研究”)［26］。