（二）材料

1.实验器械

(1)组织匀浆机 (IKA，Germany，ULTRA-TURRAX T8，图5-1)。

(2)游标卡尺 (VWR，USA，62379-531，图5-2)。

(3)1mL注射器。

(4)27号针头。

(5)70%乙醇。

(6)C57/BL6小鼠：雄性，10～14周龄 (注释1)。(https://www.daowen.com)

图5-1　组织匀浆机

图5-2　游标卡尺

2.实验试剂

(1)含结核杆菌的弗氏完全佐剂：称量200mg热灭活结核杆菌菌株 H37RA株 (Difco Laboratories，USA，Cat.231141)，与30mL弗氏不完全佐剂 (BD Biosciences，USA，Cat.263910)充分混匀，配制成含有6.67 mg/mL结核杆菌的弗氏完全佐剂。本试剂储存于4℃，一年内使用。(注释2)

(2)0.1M醋酸溶液：将 0.4 mL醋酸 (Sigma-Aldrich，USA，Cat.A8976)加入100mL蒸馏水，配制成0.1M的醋酸溶液。将10 mg免疫级鸡Ⅱ型胶原 (Chondrex，USA，Cat.20011)加入2.5mL 0.1M的醋酸溶液，4℃过夜混匀。分装储存于-20℃，避免反复冻融，一年内使用。

(3)免疫乳液：取等量的免疫级鸡Ⅱ型胶原与含结核杆菌的弗氏完全佐剂充分混匀，利用匀浆机短时多次匀浆，配制免疫乳液。为避免过度产热，可于冰上配制，现配现用。每只小鼠一次免疫注射需0.1mL免疫乳液，如免疫注射10只小鼠，需配制1.5mL免疫乳液。(注释3)