(四)注释

(四)注释

1.由于雄性和雌性小鼠的CIA发生率基本相同[5],且雄性小鼠对免疫注射的耐受性较好,所以推荐选用雄性小鼠构建CIA模型。不要合笼6周龄以上的非同窝雄性小鼠,这样容易引起小鼠互相打架,导致小鼠处于应激状态,影响关节炎的发生率。

2.吸入结核杆菌对人体有害,因此应在通风橱内进行配制。

3.免疫乳液需要足够黏稠,可以将一滴配制好的免疫乳液滴至水面,如果乳液不化开,说明黏稠度合适,否则需要重新匀浆或重新配制。图5-3显示免疫乳液的配制是成功的。

4.可用实验室常用的麻醉小鼠方法,腹腔注射麻醉或吸入麻醉均可,麻醉程度以不影响免疫注射为宜。

5.当使用转基因小鼠时,需利用同窝小鼠或者同样来源的C57BL/6小鼠设置对照,并且所有小鼠需饲养在同样的环境下。

6.注射时避免产生气泡,以免影响注射的药量。

7.由于免疫注射,在注射后一周左右,鼠尾会因局部炎症明显增粗。如果注射部位发生严重溃疡,应立即将小鼠处死。

8.第二次免疫注射并不能显著增加C57BL/6小鼠关节炎的发生率。但是不同的转基因小鼠或小鼠品系可能对第二次免疫的反应不同,需进行实验验证。

9.应由同一人完成小鼠关节炎的评分。如果由不同的人完成,则可能分值的变异较大。

10.有的小鼠会发生严重的关节炎,且不同转基因小鼠的关节炎严重程度需依靠实验得知。所以应每日监控小鼠,如果小鼠爪子严重肿胀或体重丢失达20%,应及时将小鼠处死。

(孙 雯 邢联平)(https://www.daowen.com)

参考文献

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