结缔组织病相关自身抗体
1.抗核抗体
（1）定义：抗核抗体（ANA）指抗细胞核成分［脱氧核糖核酸（DNA）、核糖核酸（RNA）、蛋白质和酶］的抗体的总称。由于某些核抗原成分在核仁和胞浆内比细胞核内更丰富，因此更广义的ANA的定义应是指抗核酸和核蛋白抗体的总称。根据具体抗原成分的不同，ANA包含着一组自身抗体，如抗双链脱氧核糖核酸（dsDNA）抗体、抗组蛋白抗体（AHA）、抗核小体抗体（ANuA）、抗Smith（Sm）抗体、抗UI核糖核蛋白（U1RNP）抗体、抗核糖体P蛋白（rRNP）抗体、抗SSA与抗SSB抗体、抗Jo-1抗体、抗ScL-70抗体、抗着丝点抗体（ACA）等，这些又被统称为抗核抗体谱（ANAs）。
（2）ANA及ANAs检测的临床意义：①有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断（如抗Sm抗体、抗Scl-70抗体等）。②部分抗体有助于观察疾病活动度和对治疗的反应（如抗dsDNA抗体）。③部分抗体有助于判断疾病亚型和预后（如抗Jo-1、抗SSA等）。④有助于研究发病机制（如：抗核小体抗体、抗dsDNA抗体）。
表3-1-1 ANAs的临床意义
续表
（3）ANA的检测方法：一般采用间接免疫荧光法（IIF），将稀释的待测血清滴至人喉癌上皮（Hep-2）细胞上，若待测血清中存在抗核抗体，则可与Hep-2细胞中的抗原形成抗原抗体复合物。加入荧光素标记的羊抗人IgG抗体（第二抗体），便可以在荧光显微镜下观察到相应的荧光核型。Hep-2细胞的优点：核抗原丰富（内含100～150种自身抗原），特异性强，含量高，核大，细胞结构清晰，易于结果观察及荧光核型分析。因此，以Hep-2细胞为底物的IIF法是ANA初筛的“金标准”。ANA检测的结果包括ANA滴度和ANA荧光核型。
（4）ANA滴度的意义：①结缔组织病的初筛。②感染性疾病、肿瘤患者及5%的正常人也可出现低滴度阳性。③ANA阴性基本可以除外SLE。④ANA滴度与疾病活动性无明确相关性。⑤阳性标本还需予进一步识别。
（5）ANA荧光核型的型别：目前国际公认的ANA检测方法为Hep-2细胞作为底物的IIF检测，根据荧光核型可分为：均质型（H）、斑点型（S）、核仁型（N）、着丝点型（ACA）和核膜型（M）等。ANAs不同荧光核型的诊断流程见图3-1-1。
图3-1-1 ANAs不同荧光核型诊断流程(https://www.daowen.com)
2.抗磷脂抗体
（1）定义：抗磷脂（APL）抗体是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体。
（2）APL抗体的检测方法：抗心磷脂（aCL）抗体和抗β2-GP1抗体采用ELISA方法检测；狼疮抗凝物采用白陶土凝固时间、Russell viper venom时间、活化部分凝血活酶时间（APTT）、蛇毒时间等。
（3）APL抗体谱检测的临床意义：有助于SLE、习惯性流产、神经系统疾病、急/慢性白血病、肾脏和消化系统疾病的诊断，包括抗心磷脂（aCL）抗体、狼疮抗凝物（LAC）、抗β2糖蛋白1抗体（抗β2-GP1抗体）等成分。高水平的APL IgG型对原发性抗磷脂综合征（PAPS）的诊断最为特异。
表3-1-2 APL抗体谱的临床意义
3.ANCA
（1）定义：ANCA是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的一组自身抗体。
（2）ANCA的检测方法：最常用的方法为间接免疫荧光法（IIF）。将稀释后的待检血清滴在人粒细胞抗原基质上，如被检血清中存在ANCA，其与基质中的中性粒细胞胞浆抗原结合，形成抗原抗体复合物（主要是IgG类），再与加入的羊抗人IgG荧光抗体结合，在荧光显微镜下可在中性粒细胞的胞浆、核周或其他位置观察到亮绿色荧光染色，此为ANCA阳性。
ANCA存在多种靶抗原，其中蛋白酶3（PR3）和髓过氧化物酶（MPO）是最有意义的抗原成分，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测针对不同靶抗原成分的抗体可帮助确证ANCA检测和分型，是不同类型原发性小血管炎特异性血清学诊断及临床治疗监测的重要工具。
（3）ANCA谱检测的临床意义：①对系统性血管炎、炎症性肠病和自身免疫性肝病等疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。②胞浆型ANCA（cANCA）其靶抗原主要是PR3，cANCA诊断肉芽肿性多血管炎（GPA）的特异性大于90%，PR3-ANCA诊断GPA的转异性可超过95%。cANCA和PR3-ANCA抗体滴度与GPA患者病情活动度一致，可作为判断GPA等原发性血管炎疗效和预测复发的指标。③核周型ANCA（pANCA）靶抗原主要是MPO，MPO-ANCA主要与显微镜下多血管炎（MPA）、坏死性新月体型肾小球肾炎（NCGN）、结节性多动脉炎（PAN）和嗜酸性肉芽肿性血管炎（EGPA）等相关，也可出现在炎症性肠病等其他疾病。MPO-ANCA与病情活动相关，也可用于疾病疗效评估和预测复发。