二、人工培养

2026年08月17日

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二、人工培养

人工培养细菌需给细菌提供适宜生长的培养基和选择合适的培养方法。

（一）培养基和培养方法

培养基（culture medium）是根据细菌生长繁殖的需要，按一定比例配制经灭菌而成的无菌营养物制品。培养基的种类繁多，常用的有以下几种。

1.基础培养基（basal medium）含有细菌生长繁殖所需的最基本营养成分，如肉浸液或肉膏汤，含肉膏、蛋白胨、氯化钠和水等。

2.营养培养基（nutrient medium）在基础培养基中添加某些特殊的营养物质（如葡萄糖、血液、血清、动物腹腔液、酵母浸膏、生长因子等），以满足营养要求较高的细菌生长，最常用的是血琼脂平板。

3.选择培养基（selective medium）在培养基中加入可抑制某些细菌生长的一些化学物质，以筛选出目标菌，如用于肠道病原菌（沙门菌属、志贺菌属）分离的SS培养基。

4.鉴别培养基（differential medium）给培养基中加入某些底物和指示剂，使细菌培养后出现某种肉眼可见的特征性变化，用于鉴别细菌，如双糖铁培养基、醋酸铅培养基等。(https://www.daowen.com)

5.厌氧培养基（anaerobic medium）在培养基中加入还原剂，以降低培养基的氧化还原电势，并加入亚甲蓝（美蓝）作为氧化还原指示剂，常用的有庖肉培养基。目前多为厌氧环境替代，如厌氧培养箱或真空干燥缸等。

6.专用培养基 Korthof培养基用于钩端螺旋体的培养，沙保（Sabouraud）培养基用于真菌的培养等。

根据不同标本及不同培养目的，可选用不同的接种和培养方法。常用的有细菌的分离培养和纯培养两种方法。

（二）细菌在培养基中的生长现象

培养基根据其物理性状不同，可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。将细菌接种于3种不同物理性状的培养基，可观察到不同的生长现象。①液体培养基：多数细菌在液体培养基中呈现混浊生长或沉淀生长；专性需氧菌则多呈表面生长，形成菌膜。②固体培养基：将标本划线接种在固体培养基表面，经过18～24小时培养，由单个细菌繁殖而形成肉眼可见的细菌集团，称为菌落（colony）。不同细菌菌落的大小、颜色、透明度、表面与边缘情况、光滑或粗糙、湿润或干燥、有无溶血性等表现各不相同，有助于鉴别细菌。如支原体典型菌落呈荷包蛋样等。③半固体培养基：用穿刺针将细菌接种于半固体培养基中，有鞭毛的细菌沿穿刺线向周围扩散生长，可见整个培养基呈云雾状，穿刺线模糊不清；无鞭毛的细菌只能沿穿刺线生长，不向周围扩散，培养基仍透明，穿刺线清晰可见。