代谢与生长繁殖
细菌在生长繁殖过程中,需要进行新陈代谢,如通过分解代谢给细菌提供能量(能量代谢),合成代谢为细菌提供其结构成分。在人体内,细菌的某些代谢产物可对人体发挥有利作用如维生素等,也可能是致病物质如细菌毒素等。
(一)代谢
1.能量代谢 病原菌均系化能异养菌,仅能从有机营养物分解氧化过程中获得以高能磷酸键形式(ADP、ATP)储存的能量。
细菌可通过底物水平磷酸化或氧化磷酸化方式合成ATP。前者见于糖酵解途径,也是大多数细菌共有、专性厌氧菌仅有的产能途径:1分子葡萄糖分解形成2个高能磷酸化合物中间体,其上高能磷酸基团分别转移到ADP分子上生成2个ATP,脱下的氢被有机物(NAD+)接受。氧化磷酸化指ATP合成耦联着生物氧化,生物氧化过程中伴随着脱氢与脱羧,有机营养物在细胞内分解产生二氧化碳,故亦称细胞呼吸。在有氧或无氧环境中,有机物的代谢产物和产生能量是不同的:有氧呼吸以分子氧为受氢体,1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和水,可产生30或32分子分子ATP;厌氧呼吸以无机氧化物为受氢体,典型如1分子葡萄糖转化为2分子乳酸,仅生成2个ATP。需氧菌、兼性厌氧菌进行需氧呼吸,专性厌氧菌、兼性厌氧菌的厌氧呼吸和发酵在无氧条件下才能进行。
2.代谢产物
(1)分解代谢产物及医学意义:各种细菌所具有的酶不完全相同,对营养物质的分解能力亦不一致,其代谢产物亦有别。根据此特点,利用生物化学方法来检测、鉴别不同细菌称为细菌的生化反应试验,如常用吲哚(indol)、甲基红(methyl red)、VP(Voges-Proskauer)、枸橼酸盐利用(citrate utilization)4项试验鉴定肠道杆菌。
(2)合成代谢产物及其医学意义:细菌利用分解代谢中的产物和能量不断合成菌体自身成分,如细胞壁、多糖、蛋白质、脂肪酸、核酸等,同时还合成一些在医学上具有重要意义的代谢产物。①致热原(pyrogen):或称热原质,为注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。致热原主要由G-菌产生,大多为LPS。②毒素与侵袭性酶:细菌可产生外毒素和内毒素两类毒素,某些细菌还可产生具有侵袭性的酶,在细菌致病作用中甚为重要,如霍乱弧菌的肠毒素、链球菌的透明质酸酶等。③色素:某些细菌能产生不同颜色的色素,有助于鉴别细菌。细菌的色素有两类:一类为水溶性,如铜绿假单胞菌产生的色素使培养基或感染的脓液呈绿色;另一类为脂溶性,不溶于水,只存在于菌体,使菌落显色而培养基颜色不变,如金黄色葡萄球菌的色素。④抗生素:某些微生物在代谢过程中产生的一类次级代谢产物,能抑制或杀死某些微生物或肿瘤细胞,称为抗生素。多由放线菌和真菌产生,细菌所产甚少,仅多黏菌素、杆菌肽等。⑤细菌素:指某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。与抗生素不同的是作用范围狭窄,仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。细菌素在治疗方面的应用价值不大,但可用于细菌分型和流行病学调查。⑥维生素:细菌能合成某些维生素,除供自身需要外,还能分泌至周围环境中。例如,人体肠道内的大肠埃希菌,其合成的B族维生素和维生素K也可被人体吸收利用。
(二)生长繁殖
1.条件 细菌生长繁殖所需要的条件主要包括营养物质、合适的酸碱度、适宜的温度和气体。
(1)营养物质:营养物质是细菌新陈代谢及生长繁殖不可缺少的成分,主要包括以下方面。①水:细菌所需营养物质必须先溶于水,营养的吸收与代谢均需有水才能进行。②碳源和氮源:来源于无机物或有机物,合成菌体组分和作为获得能量的主要来源。根据细菌利用能源和碳源的不同,将细菌分为自养型细菌和异养型细菌两大类。自养型细菌以无机物作为营养的来源,异养型细菌以有机物作为营养的来源,致病菌主要从糖类、氨基酸、蛋白胨等有机物中获得碳源或氮源。③无机盐:作为酶的组成部分,维持酶的活性;参与能量的储存和转运。调节菌体内外的渗透压;参与菌体的构成成分。④生长因子:许多细菌的生长还需一些自身不能合成的生长因子(growth factor),如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。少数细菌还需特殊的生长因子,如流感嗜血杆菌需要Ⅹ、Ⅴ两种因子,X因子是高铁血红素,V因子是辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ,两者为细菌呼吸所必需。
(2)酸碱度(p H):多数病原菌最适生长p H为7.2~7.6;个别细菌如霍乱弧菌在p H为8.4~9.2时生长最好,结核分枝杆菌生长的最适p H为6.5~6.8。(https://www.daowen.com)
(3)温度:病原菌在长期进化过程中适应人体环境,最适生长温度与人的体温相近,即37℃。
(4)气体:细菌生长所需要的气体主要是氧气和二氧化碳。大部分细菌在新陈代谢过程中产生的CO2可满足自身需要,根据细菌代谢时对分子氧的需要与否分为4类:①专性需氧菌(obligate aerobe):具有完善的呼吸酶系统,需要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸,仅能在有氧环境下生长,如结核分枝杆菌。②微需氧菌(microaerophilic bacterium):在低氧(5%~6%)时生长最好,如空肠弯曲菌。③兼性厌氧菌(facultative anaerobe):兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能,不论在有氧或无氧环境中都能生长,大多数病原菌属于此。④专性厌氧菌(obligate anaerobe):缺乏完善的呼吸酶系统,利用氧以外的其他物质作为受氢体,只能在无氧环境中进行发酵,如破伤风梭菌。
2.方式与生长曲线
(1)方式:细菌一般以简单的无性二分裂方式进行繁殖。在适宜条件下,多数细菌繁殖速度很快,20~30分钟增殖一代。个别细菌繁殖速度较慢,如结核分枝杆菌的代时长达18~20小时。
细菌分裂时菌体首先增大,染色体复制。G+菌的染色体与中介体相连,当染色体复制时中介体一分为二,各向两端移动,分别将复制好的一条染色体拉向细胞的一侧;接着染色体中部的细胞膜向内陷入,形成横隔,同时细胞壁亦向内生长;最后,肽聚糖水解酶使细胞壁肽聚糖的共价键断裂,分裂成为2个菌体。G-菌无中介体,染色体直接连接在细胞膜上,复制产生的新染色体则附着在邻近的一点上;在两点间形成新细胞膜,将各自的染色体分隔在两侧;最后细胞壁沿横隔内陷,整个细胞分裂成2个子代细胞。
(2)生长曲线:将一定数量的细菌接种于适宜的液体培养基中,连续定时取样以检查活菌数,可发现其生长过程的规律性。以大肠埃希菌为例,培养时间为横坐标,培养物中活菌数的对数为纵坐标,可绘制出一条生长曲线(图11-6)。

图11-6 大肠埃希菌的生长曲线
根据生长曲线,细菌的群体生长繁殖可分为4期。①迟缓期(lag phase):为细菌进入新环境后的短暂适应阶段。该期菌体增大,代谢活跃,为细菌的分裂繁殖合成并积累充足的酶、辅酶、中间代谢产物;此期细菌分裂迟缓,极少增殖。迟缓期长短不一,按菌种、接种菌的菌龄和菌量,以及营养物等不同而异,一般为1~4小时。②对数期(logarithmic phase):细菌在该期生长迅速,活菌数以恒定的几何级数增长,生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升,达到顶峰状态。此期细菌的形态、染色性、生理活性等都较典型,对外界环境因素的作用敏感。因此,研究细菌的生物学性状(形态染色、生化反应、药敏试验等)应选用该期的细菌。一般细菌对数期在培养后的8~18小时。③稳定期(stationary phase):由于培养基中营养物质消耗,有害代谢产物积聚,该期细菌繁殖速度渐减,死亡数逐渐增加,细菌形态、染色性和生理性状常有改变。一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。④衰亡期(decline phase):稳定期后细菌繁殖越来越慢,死亡数越来越多,并超过活菌数。该期细菌形态可显著改变,出现衰退型或菌体自溶,难以辨认;生理代谢活动也趋于停滞。因此,陈旧培养的细菌难以鉴定。
细菌生长曲线只有在体外人工培养的条件下才能观察到,对细菌的研究和生产实践均有指导意义。