一、梅毒
梅毒实验室检测结果是梅毒诊断的主要依据,包括病原学检测和血清学检测。
(一)病原学检测
病原学检测有暗视野显微镜检查、镀银染色检查及核酸检测等方法。
1.原理 在梅毒螺旋体感染后,局部出现的硬下疳、肿大淋巴结的淋巴液,以及二期梅毒湿丘疹、扁平湿疣及黏膜斑皮损,梅毒孕妇羊水中存在梅毒螺旋体,可以通过暗视野显微镜、镀银染色或核酸检测检出。
2.检测方法
(1)暗视野显微镜检查:取皮损部位渗出液或淋巴结抽吸液,立即在暗视野显微镜下查找具有特征性形态和运动特点的梅毒螺旋体。
(2)镀银染色法:取材同上。梅毒螺旋体具有亲银性,可被含银染液染成棕黑色,显微镜下可观察到呈棕褐色的梅毒螺旋体。
(3)核酸检测:取材同上。采用PCR等核酸扩增的方法,扩增检测梅毒螺旋体特异性DNA片段。
3.临床意义
(1)病原学检查是一期、二期梅毒重要的诊断依据,推荐作为性病诊疗机构实验室常规检测手段之一。
(2)显微镜检测的敏感性较低,未见梅毒螺旋体不能排除梅毒。局部外用药物、口服抗生素、皮损已接近自然消退、操作人员经验不足等均可导致假阴性结果。
(3)核酸检测的敏感性较高,但如取材不当,或标本中含梅毒螺旋体数量少,或含有抑制物,均可导致假阴性结果。
(二)血清学检测
血清学检测包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验两大类,见表3-1。
1.原理
(1)非梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒患者体内针对心磷脂抗原的抗体,亦称为反应素。感染梅毒螺旋体3~4周后即可产生这种抗体,经过有效的抗梅毒治疗后,此抗体滴度可下降直至转阴。
(2)梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒患者体内抗梅毒螺旋体抗原的抗体。感染梅毒螺旋体后2~4周可产生该抗体,一般情况下,抗梅毒治疗后该抗体仍持续存在,不能从体内消失。
表3-1 梅毒血清学检测方法

2.检测方法
(1)RPR/TRUST:分为定性和半定量试验。定性试验为原倍血清与抗原反应,产生凝集反应为阳性结果;半定量试验是将定性试验阳性的血清进行对倍稀释,根据出现凝集反应的血清最高稀释倍数报告抗体滴度。
(2)VDRL:检测方法类似于RPR,但结果需要采用显微镜观察,目前国内尚无商品化试剂。(https://www.daowen.com)
(3)TPPA:是目前梅毒螺旋体血清学试验的“金标准”,具有较高的敏感性和特异性。试剂中的致敏颗粒与血清反应出现凝集现象为阳性结果。
(4)ELISA/CLIA:通过酶促底物显色或发光检测抗体,适合大批量标本的检测,标本A值大于或等于阈值为阳性结果。此类方法的特点是具有较高的敏感性,但存在一定的假阳性,建议对该方法阳性血清采用TPPA方法复检。
(5)RT:该方法简便快速,根据显色条带判读结果。建议对该方法阳性血清采用TPPA方法复检。
(6)IgM 抗体检测:采用IgM-FTA-ABS、IgMELISA或IgM-蛋白印迹法检测患者血中抗梅毒螺旋体IgM抗体。目前国内的商品化试剂是采用蛋白印迹法。
3.临床意义
梅毒螺旋体血清学试验和非梅毒螺旋体血清学试验的结果解释见表3-2。两类试验具有不同的临床意义,需要综合两类试验的结果,并结合病史和临床表现,才能做出正确的诊断。
表3-2 梅毒血清学试验结果的参考解释

注:两类梅毒血清学试验均阳性也见于胎传梅毒,但后者的诊断要参照病史及非梅毒螺旋体血清学试验滴度变化情况来综合判断(参见第四章“特定疾病的临床处理”第一节“梅毒”)。
(1)非梅毒螺旋体血清学试验:非梅毒螺旋体血清学试验结果阳性可作为诊断梅毒感染的依据,但该试验存在一定的生物学假阳性,所以检测阳性结果需通过梅毒螺旋体血清学试验确证。观察血清中该抗体的滴度的变化可以用于梅毒疗效的判断。VDRL检测脑脊液中的抗体对于诊断神经梅毒有重要价值。
(2)梅毒螺旋体血清学试验:梅毒螺旋体血清学试验结果阳性可确认为梅毒螺旋体感染。因既往感染已治愈的患者该抗体也可为阳性,需通过非梅毒螺旋体血清学试验验证是否为现症梅毒,所以也不能作为疗效的观察指标。
(3)IgM抗体:新生儿血中检测到IgM抗体是胎传梅毒的诊断依据。脑脊液中检测到Ig M抗体可作为神经梅毒的确诊依据。
(4)窗口期:两类梅毒血清学试验均存在抗体产生的“窗口期”,在梅毒感染的较早期,抗体检测可呈阴性。因此梅毒血清学试验结果阴性时,应根据病史、临床表现以及高危行为史判断是否需要进一步做血清学检测随访。
4.检测策略
梅毒血清学检测策略主要分为经典策略、逆向策略。
(1)经典策略:采用非梅毒螺旋体血清学试验初筛。
采用RPR(或TRUST)对样品进行初筛,呈阴性反应的样品,可出具RPR阴性报告;对呈阳性反应的样品,需进一步采用梅毒螺旋体血清学试验(以TPPA试验为例)复检确认是否为梅毒螺旋体感染,同时做RPR定量试验用于疗效判断随访。TPPA试验呈阳性反应的样品,出具RPR阳性及滴度(1∶X)、TPPA阳性报告;TPPA试验呈阴性反应的样品,出具RPR阳性、TPPA阴性报告(图3-1)。如采用ELISA/CLIA/RT试验复检出现RPR阳性、ELISA/CLIA/RT阴性结果,建议进一步(或转诊)采用TPPA试验作验证。
(2)逆向策略:采用梅毒螺旋体血清学试验初筛。
采用ELISA/CLIA/RT对样品进行初筛,对呈阴性反应的样品,可出具ELISA/CLIA/RT阴性报告;对呈阳性反应的样品,进一步采用任何一种非梅毒螺旋体血清学试验(如RPR)进行复检,同时应做RPR半定量试验,复检时RPR呈阳性反应的样品,出具ELISA/CLIA/RT阳性、RPR阳性及滴度(1∶X)的报告。复检时RPR呈阴性反应的样品,可出具ELISA/CLIA/RT 阳-性、RPR 阴性-报-告。出-现ELISA/CLIA/RT阳性、RPR阴性结果,建议进一步(或转诊)采用TPPA试验再次复检,如复检阳性可出具ELISA/CLIA/RT阳性、TPPA 阳性、RPR 阴性报告,如复检阴性可出具ELISA/CLIA/RT阳性、TPPA阴性、RPR阴性报告。具体内容见图3-2。根据实验室条件也可采用TPPA对样品进行初筛。

图3-1 梅毒血清学经典检测策略