二、淋病

二、淋病

淋病的实验室检测主要是分泌物涂片直接显微镜检查、淋球菌培养和核酸检测。此外开展淋球菌药物敏感性检测对指导临床用药以及监测耐药趋势非常有意义。

图3-2 梅毒血清学逆向检测策略

（一）显微镜检查

1.原理 淋球菌为革兰染色阴性双球菌，无荚膜、无鞭毛、无芽孢，常成对排列，菌体呈肾形，两菌长轴平行，接触面平坦。显微镜下见到多形核白细胞内有形态典型的革兰阴性双球菌，具有一定的诊断价值。

2.检测方法 将采集的标本拭子在玻片上转动铺开，革兰染色后在油镜（×1 000）下观察。根据镜检结果报告“多形核白细胞内见到革兰阴性双球菌”或“多形核白细胞外见到革兰阴性双球菌”或“未见到革兰阴性双球菌”。

3.临床意义

（1）在有临床表现的男性患者尿道涂片中见多形核白细胞内革兰阴性双球菌，支持对淋病的诊断，其敏感性和特异性分别达到95%和98%。

（2）该方法对女性患者的宫颈涂片、男女性患者的直肠以及咽喉等部位标本涂片的临床诊断价值较小，敏感性为50%～70%。需进一步做淋球菌培养，以防漏诊。

（3）如果在多形核白细胞外见到革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。

（二）培养法

1.原理 淋球菌培养要求培养基营养丰富，含有增菌剂，并加入特定抗生素以抑制杂菌的生长。这样在合适的培养环境条件下，形成有一定形态特征的菌落，并可进一步鉴定是否为淋球菌。

2.检测方法

（1）宫颈或尿道拭子标本采集后立即接种到培养基（如改良的T-M培养基）平皿中。将培养皿置于含5%CO2的培养箱（或烛缸）中，35～36℃孵育。

（2）取典型的菌落做革兰染色、氧化酶试验，进行淋球菌的初步鉴定。(https://www.daowen.com)

（3）如有必要可行糖发酵等试验以确证淋球菌。

3.临床意义

（1）培养法是诊断淋病的“金标准”，敏感性和特异性高。

（2）对于女性患者的宫颈标本，采自非生殖器部位（如咽喉、肛门直肠、血液等）的标本，无症状感染者的标本，均适合采用培养法。培养法也适合作为判愈试验。

（3）经培养分离纯化的菌株可以在低温条件下保存，以进一步进行药敏试验。

（三）核酸检测

1.原理 常用的核酸检测技术是通过扩增淋球菌的特异性DNA片段进行检测。核酸检测与培养法相比，特异性相似但敏感性更高，检测耗时短，但需要在相关部门验收合格的核酸检测实验室进行，需要有合格的实验室条件。

2.方法 多采用实时荧光PCR法。

3.临床意义

（1）适合多种标本，如宫颈、阴道、尿道、尿液标本中的淋球菌检测，不需要活菌。

（2）具有较高的敏感性和特异性，只要有少量拷贝的靶DNA或RNA，即能扩增产生阳性信号。适合于大批量样本的筛查检测。

（3）如作为治疗后的判愈试验应在治疗后的3周后采集标本进行检测。

（四）药物敏感性检测

目前用于淋球菌药物敏感性检测的主要方法有：琼脂纸片扩散法（定性）、E-test（定量）、琼脂稀释法（定量）、微量稀释法（定量）、全自动细菌鉴定分析仪（定性）、质谱法（MALDITOF）（定性）以及分子生物学方法（定性）等，各级实验室可以根据本机构微生物实验室条件采用相应的检测方法。