EMP途径的酶系活力测定
以葡萄糖为底物，加上ATP、Mg2+和NADP，与酶液保温后不久，在340 μm波长处有光吸收现象（见图1），说明有己糖激酶的存在，所形成的G-6-P在G-6-P脱氢酶作用下，致使NADP还原。
酶液作用于G-6-P，用间苯二酚测得有果糖的形成，表明有磷酸己糖异构酶的活力。以FDP为底物，与酶液保温30分钟后，有磷酸丙糖的产生，标志着有醛缩酶的作用。若以F-6-P代替FDP为底物，在同样的条件下，再加上ATP和Mg2+，在反应液中也能测出磷酸丙糖的增加，说明还有己糖激酶的存在。
以FDP为基质，加上NAD和酶液等共同保温，用分光光度计测定，在340 μm波长处有光密度的增加，表示有还原辅酶Ⅰ的形成（见图2）。
图1 己糖激酶的活力测定
反应液含：甘氨酰甘氨酸125 μmoles，pH 7.5，MgCl2 20 μmoles，葡萄糖5 μmoles，ATP 2 μmoles，NADP 0.27μmole，酶液0.5 ml，总体积3 ml。空白缺NADP，用日立分光光度计于25℃测定340μm的光密度变化。
图2 3-磷酸甘油醛脱氢酶的活力测定
反应系统：Tris 150 μmoles，pH 8.5，FDP 10 μmoles，砷酸钠17 μmoles，NaF 10 μmoles，谷胱甘肽 15 μmoles，NAD 1 μmole，酶液0.5 ml，总体积3 ml。空白者缺NAD。于室温下用日立分光光度计测定340μm的光吸收。
这是由于FDP在醛缩酶作用下分解形成磷酸丙糖，再经3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用形成还原型的NAD。缺FDP时活力减弱，缺NAF、NAD、谷胱甘肽或砷酸盐时反应不能进行；并且反应能为碘乙酰胺和PCMB所抑制（见表1），说明油菜荚中3-磷酸甘油醛脱氢酶的性质与微生物（沈善炯等，1957，佘微明等，1964）和动物（Cori等，1948）中的相似，都以巯基为它的活力中心。但该酶很不稳定，提取时间稍长或高速离心，活力就大大降低，原因尚未弄清。
表1 辅因子和PCMB、碘乙酰胺对3-磷酸甘油醛脱氢酶活力的影响
注：*反应9分钟的计数。
**反应10分钟的计数。
反应系统见图2说明。
酶液与3-PGA、ATP和Mg2+等保温，有羟肟酸的形成，说明有1，3-DPGA的产生和3-PGA激酶的活力存在（见图3），缺ATP反应不能进行，缺Mg2+时活力大大降低（见表2），这也与一般激酶的性质相似。
以3-PGA为底物，加上酶液和辅因子ADP、Mg2+、2，3-DPGA等，反应液中有丙酮酸的产生（见图4），说明有3-PGA变位酶、烯醇化酶和丙酮酸激酶的一系列酶活力存在。缺ADP时活力下降83.3%，NaF能百分之一百的阻止丙酮酸的形成（见表3），前者是丙酮酸激酶的辅因子，后者是烯醇化酶的强烈抑制剂。
图3 磷酸甘油酸激酶的活力测定
反应系统：Tris 100 μmoles，PH 7.4，3-PGA 20 μmoles，ATP 8 μmoles，MgCl2 6 μmoles，NH2OH 1 000 μmoles，酶液0.1 ml，总体积1.3 ml，38℃，反应30分钟。用三氯乙酸终止反应。
图4 从磷酸甘油酸至丙酮酸形成的酶系活力的测定
反应系统：Tris 150μmoles，pH 7.4，3-PGA 20 μmoles，ADP 10 μmoles，MgCl2 10 μmoles，2，3-DPGA 30μg，KC1 25μmoles，酶液0.2 ml，总体积2.0 ml。于30℃保温30分钟，杀死酶液。以二硝基苯肼法测定形成的丙酮酸。
表2 辅因子对磷酸甘油酸激酶活力的影响
注：*反应系统见图3说明。
表3 辅因子和NaF对从3-PGA至丙酮酸形成的酶系活力的影响
注：*反应系统见图4说明。
至此，在成熟油菜荚中证明有从葡萄糖直至丙酮酸形成的整个EMP途径的酶系存在。
