2.方法

（1）化学分析。可溶性糖采用Fairbain（1953）的方法。用80%酒精于70℃提取样品3～4次，用蒽酮比色法定糖。残渣用30%过氯酸在室温下水解提取二次，水解提取液用蒽酮法定糖，即得淀粉含量（McCready等，1950）。总脂含量按Huerga等（1953）法，即用石油醚提取样品4～5次（50～60℃水浴中），用二氧六环-硫酸比浊法定脂。蛋白质和可溶氮的测定是用5%三氯乙酸提取样品，提取液为可溶性氮，残渣则含蛋白氮。分别加浓硫酸和接触剂加热消化，用Nesseler-Folin比色法定氮。总氮含量×6.25=蛋白质含量。氨基酸按Moore和Stein（1948）法，用5%三氯乙酸的样品提取液用茚三酮比色法测定。磷化合物分部方法如下：用5%三氯乙酸提取样品，提取液直接测定无机磷。提取液用三酸消化后测得的磷减去无机磷为酸溶性有机磷。残渣消化后定磷为酸不溶性有机磷。三种磷的总和为总磷。植质磷测定按Pons等（1953）方法稍作修改：用三氯乙酸提取样品。定磷沿用Bertramson（1943）的钼青比色法。

（2）呼吸测定。用Warburg呼吸器测定种子氧吸收。种子去皮后，迅速称取粒数和重量都一样的样品（每组粒数为3～10粒，重量在0.4～1.0g，每组样品1小时总耗氧量为150～250 μl）。分别用各处理溶液减压渗入：抽气半小时，一般总共渗入2小时。取出种子，用滤纸吸干，迅速置于反应瓶主室中（内盛同样的处理溶液0.5 ml），中央井加KOH（20%）0.2 ml。于30℃测定反应瓶中气压变化，每15分钟读数一次，共持续1小时。(https://www.daowen.com)

（3）丙酮粉的制备和酶活力测定。丙酮粉制备方法见以前介绍（施教耐等，1965a），放在15℃冰箱中保存，用pH 7.2 EDTA（0.001 5 mol/L）和磷酸钾缓冲液（0.01 mol/L）研磨提取，在10 000×g下高速离心10分钟。上清液测定G-6-P脱氢酶、6-PG脱氢酶和醛缩酶；另外取一部分丙酮粉用pH 9.0硼酸缓冲液提取，测定G-6-P异构酶的活力。G-6-P脱氢酶和6-PG脱氢酶的测定是根据NADPH的形成，用Beckman DU型分光光度计测定340 mμm处的光密度变化，温度38℃，时间为1分钟。醛缩酶是根据FDP分解，用二硝基苯肼显色法测定形成的磷酸丙糖量。G-6-P异构酶活力的测定是用间苯二酚测定酶反应后由G-6-P所形成的果糖量。所有酶活力均换算成单位粒子每小时消耗的G-6-P微克分子数。具体测定方法见以前报告（施教耐等，1965a）。