诱变菌株和野生菌株的形态比较

在麦芽汁培养基上，野生型菌株AS 3.3002和木-3的菌丝伸展迅速，菌苔平整，绵毛状。初浅绿，后变为深橄榄色，背面蜜黄色。匍匐菌丝粗，直径达9～10微米，充满颗粒状细胞质。直立气生菌丝较细，约3微米，有些扭曲成螺旋状。厚垣孢子稀少，多生于菌丝间，偶有顶生者，近球形，无色，直径6～10微米。分生孢子梗长，主枝直径4.5～5微米，顶端着生小梗或短侧枝中下部有侧枝，侧枝长短不一，排列不规则，对生，互生，间隔距离不等，瓶梗生于侧枝及主枝上端，多呈直角，排列不规则，单生、互生或双对生，形似酒瓶，但基部明显内缩，而呈纺锤状或梭形，有时向主轴方向弯曲，长4.5～6微米，直径2.5～3.0微米，有的可长达10～12微米。分生孢子大多呈椭圆形或长椭圆形，稍有棱角。电子显微镜观察，孢子纵向有明显削面，孢子顶端圆，基部往往平截，大多（3.5～4.5）微米×（1.8～2.5）微米，最大的可达（5.0～5.8）微米×（2.5～3.0）微米，但长度不超过6.0微米。孢子大小和形态变化较大（尤其是木-3）。这两株菌应属于Rifai分类系统中的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii，Rifai）。

变异株EA3-867在麦芽汁培养基上较原始菌株AS 3.3002生长慢，菌苔较薄，产生孢子少，但分生孢子梗的分枝较多而密，直接着生于主枝的小梗少。分生孢子梗的主梗及侧枝往往弯曲，侧枝稍长。N2-78与木-3比较，生长速度明显降低，菌落变小，菌苔薄，孢子产生慢且少，分生孢子梗的分枝稍多而密，长椭圆形及近圆柱形的分生孢子比例增多，袍子长度增加，可达（6.5～7.4）微米×（1.8～2.5）微米。AS 3.3002和EA3-867菌落反面均为浅绿黄色，木-3和N2-78则均为蜜黄色。

四株菌在马铃薯-葡萄糖培养基上培养三天后的形态比较如表1所示。可见野生型菌株和变异株在菌落形态、生长速度、孢子形成等方面有明显的差异。变异菌株的菌落明显缩小，生长变慢，孢子形成迟而稀少（见图1）。其中N2-78菌落最小，生长最差，孢子最少。EA3-867的菌落颜色比AS 3.3002略淡，木-3为草绿色。N2-78为黄绿色，在马铃薯-纤维素粉或合成培养基-纤维素粉琼脂平板上，EA3-867和N2-78菌落颜色都较野生型菌株浅。诱变菌株在以上几种培养基平板上经常分泌较多的黄色色素，色素的形成与氮源种类无关（硝态氮、氨态氮或有机氮），在液体培养滤液中也常有黄色色素加深的现象，此结果与Norkrans［15］报告相似。尚不清楚黄色色素与酶活力的关系。还可看到菌丝、小梗和孢子形态上的一些变化（见表2）：N2-78菌株较木-3菌株菌丝加粗，小梗伸长，孢子变长和变大。同在麦芽汁培养基上一样，经常见到N2-78有较长的柱形袍子，EA3-867有时也有。它们的电子显微镜照片如图2所示，这种柱形的孢子是否与纤维素酶活力的提高有关值得进一步研究。AS3.3002经诱变后，菌丝也加粗，但小梗缩短，光学显徽镜和电子显微镜观察都表明四株菌株的分生孢子壁是光滑的，没有小疣状突起，在显微镜下单个孢子看不出有颜色，成堆时呈绿色。根据以上孢子特征，AS3.3002和木-3不应归入绿色木霉。(https://www.daowen.com)

四株菌株的分生孢子悬浮液经不同温度处理后，在马铃薯—葡萄糖琼脂平板上，于30℃培养3天，观察孢子存活情况，结果表明经80℃以上处理后，不能萌发生长。